2009年, 第16卷, 第1期　刊出日期：2009-02-25

  

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临床研究
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  儿童肺炎支原体感染检测MBL和CRP的意义

  王艾丽，严孝岭，罗冰，熊华

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 1-2.

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  探讨肺炎支原体(MP)感染患儿血清甘露糖结合凝集素(MBL)和C-反应蛋白(CRP)水平变化的意义。用ELISA和速率散射比浊法分别检测患儿血清MBL和CRP水平。结果显示，57例MP感染患儿MBL水平(3.64±1.72mg/L)和CRP(21.44±15.02mg/L)比对照组(2.18±1.05mg/L和2.76±1.81mg/L)显著增高﹙P＜0.001﹚。年龄小于8岁患儿MBL水平低于年龄大于8岁患儿，其中8例反复呼吸道感染患儿MBL水平﹙2.02±1.21mg/L)显著低于其它患儿(3.95±1.63mg/L，P＜0.01﹚。患儿恢复期CRP水平明显降低。结果提示，血清MBL和CRP水平可作为监测MP感染患儿天然免疫功能的指标，动态检测有助于评价疗效。
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  利尿钠肽在诊断心力衰竭中的应用价值

  宋春丽，刘海红，赵宁，李洁，黄建民

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 3-5.

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  探讨利尿钠肽的水平对心力衰竭(心衰)早期诊断的应用价值。采用放免法、ELISA法检测了129例心衰患者血浆中的心房利尿钠肽(ANP)、脑利尿钠肽(BNP) 、N末端脑钠肽前体蛋白(NT-proBNP)水平，并与30例健康对照者进行了比较分析。结果显示，心衰患者血浆中的ANP、BNP、NT-proBNP显著高于健康对照组，且均随着NYHA分级的升高而逐渐增加，其含量在NYHAⅣ级时到达最高，心衰患者的血浆ANP、NT-proBNP水平与LVEF呈明显负相关。检测血浆中的ANP、BNP、NT-proBNP含量简便、快捷，可用于心衰诊断及NYHA分级判断。
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  CYFRA21-1、CA724、AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

  赵惠柳，黄昭东，刘志民，雷考宁，黄金莲

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 6-7.

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  探讨血清CYFRA21-1、CA724、AFP联合检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。选取PHC患者65例、肝硬化患者47例、正常对照组40名，应用电化学发光免疫分析技术检测其血清CYFRA21-1、CA724、AFP水平。结果表明: PHC患者血清AFP、CYFRA21-1、CA724阳性率分别为72.3%、44.6%、35.4%;AFP、 CYFRA21-1和CA724三项联合检测阳性率有显著提高，达95.4%，与单一AFP阳性率相比有显著性差异( P＜0.05)，而特异性无明显下降( P＞0.05)。AF P、CYFRA21-1和CA724联合检测对原发性肝癌的诊断具有良好的临床应用价值。
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  乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床意义

  张艳超

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 8-10.

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  探讨乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1)检测在乙型肝炎病毒诊断中的临床意义。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应技术(fluorescence quantitative PCR，FQ-PCR)对650份HBV-M不同阳性模式及40份HBV-M全阴性模式血清标本进行乙型肝炎病毒Pre-S1、乙肝五项和HBV-DNA检测，并对三种检测结果进行统计学分析。在650份HBV-M不同阳性模式标本中，在119份大三阳标本中Pre-S1阳性检出率92.4%，HBV-DNA阳性检出率100%，在186份小三阳标本中Pre-S1阳性检出率42.5%，HBV-DNA阳性检出率63.4%，在21例HBsAg(+)和HBcAb(+)阳性组中Pre-S1阳性检出率47.6%，HBV-DNA阳性检出率66.7%;在297例HBsAb(+)标本中Pre-S1阳性检出率0.4%，HBV-DNA阳性检出率0%，在268例HBV-DNA阳性的标本中Pre-S1阳性检出率79.3%。在40份HBV-M全阴模式中Pre-S1阳性检出率0%， HBV-DNA阳性检出率0%。Pre-S1在大三阳、小三阳及HBV-DNA阳性组阳性检出率明显高于阴性组(P＜0.01)， Pre-S1检测可补充和完善乙肝“两对半”检测的不足，尤其对HBeAg阴性或变异的HBV感染者能更好的反映病毒的复制状态和传染性。
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  胃癌组织中MMP-2的表达及其临床意义

  赫义哲，姚春祥，臧唯

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 11-12.

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  研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2， MMP-2)在胃癌组织的表达以及与胃癌浸润转移的关系。采用SP免疫组织化学技术，取本院病理科存档的胃癌石蜡标本46例及正常胃组织15例，每例切片2张，检测MMP-2的表达情况，用SPSS 10.0统计软件分析其与胃癌浸润转移的关系。结果显示，15例正常胃组织中MMP-2的表达为阴性，胃癌组织MMP-2的阳性表达率为71.7%(33/46)，显著高于正常胃组织(P＜0.05)，MMP-2阳性表达与胃癌淋巴结转移、临床分期、浸润深度相关(P＜0.05)，与肿瘤大小及分化程度无关(P＞0.05)。MMP-2的高表达促进了胃癌的浸润和转移，提示MMP-2可作为判断胃癌预后的指标和化学治疗的靶点。
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  CEA、CA15-3和CA125对乳腺癌的诊断价值以及影响因素探讨

  许隽颖，刘超英

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 13-15.

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  研究肿瘤标志物CEA、CA15-3和CA125对乳腺癌的诊断价值，并对影响肿瘤标志物阳性率的相关因素进行分析。采用CLIA法测定血清CEA、CA15-3和CA125水平，以CEA>4.8μg／mL、CA15-3>25U／mL、CA125 >35U／mL作为诊断阳性标准。乳腺癌组患者59例，乳腺良性组患者69例，对照组65名。结果表明:乳腺癌CEA，CA15-3和CA125水平较对照组和乳腺良性组明显升高(P＜0.05)。CA15-3的灵敏度(42.4％)最高，CA125的特异度(89.6％)最高。采用平行联检法，可提高乳腺癌诊断的灵敏度(67.8％ )和阴性预测值(85.0％)。而采用系列联检法，可提高特异度(91.0％)和阳性预测值(58.6％)。与乳腺癌肿瘤标志物阳性率显著相关的因素有:肿瘤分期、皮肤改变、淋巴转移、远处转移和P53( P＜0.05)。
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  血清抗S-100b蛋白自身抗体水平与精神分裂症的关系

  袁建民，张明镰，王志强

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 16-18.

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  运用ELISA技术测定血清抗S-100b蛋白自身抗体，研究精神分裂症与血清抗S-100b蛋白自身抗体的关系。用间接ELISA检测153例正常人、32例连续服抗精神病药物的复发精神分裂症患者、98例入院前至少14天未服抗精神病药物的复发精神分裂症患者(60例完成12周治疗，再次测定抗S-100b蛋白自身抗体)及30例初发精神分裂症患者血清抗S-100b蛋白自身抗体。 正常人对照组的血清抗S-100b蛋白自身抗体阳性率为2.6%(4/153)、复发精神分裂症组为44.6%(58/130)、初发精神分裂症组为23.3%(7/30);连续服药组为40.6%(13/32)、未连续服药组为45.9%(45/98);60例完成12周治疗的分裂症患者入院时为46.7%(28/60)、12周末为40.0%(24/60)。 结果显示，精神分裂症患者血清抗S-100b蛋白自身抗体阳性率明显升高，复发精神分裂症患者入院前是否服药与血清抗S-100b蛋白自身抗体无关，分裂症患者经12周治疗前后血清抗S-100b蛋白自身抗体无变化。
基础研究
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  2型糖尿病患者C反应蛋白及rs1205多态性研究

  张阳东，田亚平，董矜，李立青，邓心新

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 19-22.

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  观察C反应蛋白(CRP)及其单个核苷酸多态性(SNP)与2型糖尿病(T2DM)的相关性。提取受检者外周血有核细胞DNA，应用荧光标记单碱基延伸分型技术及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测CRP基因的标签SNP(tag SNP)rs1205;同时采用全自动生化分析仪检测CRP及血脂水平。结果表明，T2DM组血清CRP及甘油三酯(TG)水平明显高于健康对照组(P＜0.05)，两组间的等位基因频率具有统计学差异(P＜0.05)，而两组的基因型频率及每组各基因型间CRP水平未见统计学差异(P＞0.05)。研究结果提示汉族人群CRP和TG水平是T2DM的危险因素， CRP基因 rs1205的等位基因可能是T2DM遗传易感基因。
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  瘦素对血管内皮细胞ECV-304缺氧/复氧损伤的保护作用

  杨涛，司艺玲，颜光涛

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 23-26.

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  探讨外源性瘦素(Leptin)对血管内皮细胞ECV-304缺氧/复氧(H/R)损伤保护作用及其作用机制。建立人脐静脉(ECV-304)内皮细胞缺氧/复氧损伤模型，观察不同的缺氧和复氧时间对内皮细胞的损伤作用。设立正常对照组、损伤组、干预组，每组6例;利用试剂盒测定乳酸脱氢酶、丙二醛和超氧化物歧化酶的释放量;四唑盐比色法(MTT)测定血管内皮细胞的存活率。结果显示，单纯缺氧组和缺氧/复氧组均可见细胞变圆、收缩、脱落;细胞死亡率较正常组增加;细胞上清中丙二醛(MDA)与乳酸脱氢酶(LDH)含量增加，超氧化物歧化酶(SOD)含量降低;缺氧/复氧组较单纯缺氧组损伤更加明显，与正常培养组相比具有显著意义(P＜0.05)。Leptin晚期预处理后，细胞形态基本上保持正常，上述检测指标与缺氧/复氧组相比有显著意义(P＜0.05)。并且50μg/L Leptin的保护作用最为明显。表明Leptin对ECV-304细胞缺氧/复氧损伤的保护作用具有剂量依赖性。
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  熟地黄水提液对小鼠单核细胞分泌TNF-α的影响

  李玮，王秀丽，王青，李际君，李仲兴，单保恩

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 27-28.

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  为研究熟地黄水提液对Balb/C小鼠的抗肿瘤活性，用L929生物法研究熟地黄水提液刺激Balb/C小鼠单核细胞分泌TNF-α的作用。结果表明，熟地黄组单核细胞分泌TNF-α活性与对照组相比有显著性差异(P＜0.05)，提示熟地黄水提液具有抗肿瘤活性。
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  食欲素-A在大鼠肝缺血/再灌注介导的肺损伤中作用的研究

  林季，颜光涛，薛辉，郝秀华，张凯，王录焕

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 29-33.

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  研究食欲素-A(Orexin-A)在肝缺血/再灌注(Hepatic ischemia/reperfusion，H-I/R)中表达水平的变化，及其与H-I/R介导的肺损伤的联系，探讨Orexin-A在创伤应激反应中的作用。建立大鼠70% H-I/R模型，实验设计假手术组和不同再灌注时间的损伤组，采用酶比色法检测损伤后血清髓过氧化物酶水平，采用H.E染色和免疫组织化学法分别检测损伤后肺的病理学改变及Orexin-A蛋白表达，同时采用RT-PCR法观察损伤后肺Orexin-A mRNA表达的变化。结果表明:损伤后血清髓过氧化物酶水平有逐步下降的趋势;病理学观察提示H-I/R后期肺损伤显著减轻;与损伤后假手术组相比，四个再灌注组肺Orexin-A蛋白表达均显著降低，缺血60min/再灌注60min(I60’R60’)组、I60’R240’组肺Orexin-A mRNA表达显著降低，而I60’R150’组、I60’R360’组肺Orexin-A mRNA表达显著升高。H-I/R引起Orexin-A表达水平明显的变化，这些变化提示Orexin-A在H-I/R介导的肺损伤中可能发挥一定的负性作用。
方法研究
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  等位基因特异多重PCR快速检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性研究

  焦伟伟，孙琳，李兆娜，顾艺，孙桂芝，申阿东

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 34-36.

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  了解北京地区异烟肼(INH)耐药结核分枝杆菌(MTB)的分子特点，评价等位基因特异多重PCR在INH耐药性快速检测中的应用价值。选取102株北京地区MTB临床分离株，首先分别采用PCR-RFLP和反向线性杂交技术(RLB)检测耐药相关基因katG和inhA突变，然后运用等位基因特异多重PCR方法同时检测katG和inhA基因突变，并与PCR-RFLP和RLB分别检测的结果进行比较。采用等位基因特异多重PCR检测发现，INH耐药株中60.3%(35/58)存在katG315突变，13.8%(8/58)发生了inhA突变，两者同时突变率为6.9%(4/58)，INH敏感株中没有发现katG315突变，而inhA突变率为18.2%(8/44)。上述检测结果与PCR-RFLP和RLB分别检测的结果完全一致，且等于两种方法结果之和，提示等位基因特异多重PCR可完全取代PCR-RFLP和RLB。 北京地区INH耐药菌株以katG315 AGC→ACC突变为主;联合检测katG315和inhA基因可提高INH耐药株的检出率。等位基因特异多重PCR操作简便，结果易于判断，可作为临床MTB菌株中INH耐药性快速检测的辅助手段。
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  GeXP多重基因表达系统检测外周炎性相关基因方法学探索

  董矜，田亚平，张阳东，李立青

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 37-40.

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  拟通过使用GeXP多重基因表达系统检测健康人和不同疾病外周血中炎性因子及相关基因的表达。使用GeXP多重基因表达系统对血中基因进行检测，并以β-ACTIN作为参考基因，得到血中基因表达的相对含量。优化实验体系，在不同疾病中基因表达有不同的改变。建立了外周血细胞炎性相关基因检测的条件，并对引物进行优化，为多重PCR检测技术的临床开展提供了新的思路和技术支持。
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  恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞高效体外扩增的方法

  杨博，张国庆，焦顺昌，戴为民，林星石

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 41-44.

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  探讨从恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中高效扩增淋巴细胞的方法，取3例恶性肿瘤患者的PBMCs，每例患者重复3次，在GMP实验室体系下，经淋巴细胞刺激因子体外诱导扩增淋巴细胞和观察扩增情况，应用流式细胞仪分析扩增前后总CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺淋巴细胞、CD3^-CD16+56⁺(NK细胞)、CD3⁺CD16+56⁺(NKT细胞)以及CD4⁺和CD8⁺T细胞比值的变化，分析培养前后各淋巴细胞亚群的扩增情况和重复性，同时观察淋巴细胞体外扩增培养后回输患者的生物安全性。结果表明，CD3⁺、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD16+56⁺细胞比例较培养前明显增加(P＜0.01)，而CD3⁺CD4⁺、CD3^-CD16+56⁺细胞比例、CD4⁺和CD8⁺T细胞比值则明显的降低(P＜0.01)。CD3⁺、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD16+56⁺细胞增殖倍数的中位数分别为487.9、832.5和2540.6;而CD3⁺CD4⁺和CD3^-CD16+56⁺则分别为159.6和155.5。细胞体外扩增培养前后亚型和扩增倍数的重复性较差，在本研究中只有CD3⁺T细胞在体外培养前后、CD3⁺CD16+56⁺细胞在培养后的CV值在10％以内。培养扩增后淋巴细胞细菌、真菌、支原体、外来病毒及内毒素检查后无阳性发现，所有患者细胞回输治疗后无明显的毒副反应。在本研究体系下体外诱导扩增培养肿瘤患者自体外周血NK细胞及致敏淋巴细胞效率较高，细胞毒性细胞比例增高较大，具有良好的生物安全性，为恶性肿瘤患者应用NK细胞进行过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。
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  疫透射比浊法测定肿瘤特异性生长因子方法学评价

  劳小霞，徐明辉，李泰阶，李若林，李山，秦雪

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 45-47.

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  对肿瘤特异性生长因子(TSGF)方法学和临床应用进行评价，采用免疫透射比浊法与微粒子酶免疫法(MEIA)进行比较，对其重复性、线性等进行分析。用本法与MEIA法检测120份血清标本TSGF浓度，结果经x²检验，无显著性差异(P＞0.05)，与MEIA法比较阳性符合率为95.7%，阴性符合率为96%，总符合率为95.8%;低、高浓度的批内CV为3.8%和4.2%，批间CV为4.0%和4.9%;检测浓度小于64U/mL时，线性良好，Y=0.899X+1.876，r=0.9882;RF、SLE和炎症患者血清和重度溶血、脂血、黄疸血清等对检测均有一定的影响。该TSGF方法符合临床常规实验室检测的要求。
研究报告
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  91例不育症患者血清生殖激素水平分析及其临床应用

  顾柳芬

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 48-49.

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  下丘脑-垂体-睾丸性腺轴功能的调节是人类生殖活动的关键，任何一个环节有异常都有可能导致男性不育^[1]，而血清生殖激素水平检测能反映下丘脑-垂体-睾丸性腺轴功能。本文测定血清生殖激素水平，以探讨不育症患者生殖激素检测的临床意义，报道如下。
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  老年男性体检者血清PSA结果分析

  张阳，郭勇，周颖

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 49-50.

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  前列腺特异抗原(PSA)具有严格的器官定位特异性，是目前公认的诊断前列腺癌Pa的较好肿瘤标志物之一。本文选择1 340名60岁以上的老年男性检测血清PSA水平，现报道如下。
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  不育症患者精浆IL-2R和IL-10的检测与临床应用

  楚旭，许文龙

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 50-51.

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  不育症是指婚后一年以上，有规律的性生活，未采取任何避孕措施而未能生育的状态^{[ 1 ]} 。其中，男性因素导致的不育症占有非常高的比例。为了观察精浆中细胞因子对男性生殖的影响，用化学发光免疫分析技术(CLIA)对106例不育男性精浆中的细胞因子白细胞介素-2受体(IL-2R)、白细胞介素-10(IL-10)进行了检测，以探讨检测细胞因子水平对男性不育症诊断的临床应用价值。
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  静脉补铁对血液透析患者贫血及心功能的影响

  王丽敏，刘之武

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 52-53.

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  妊娠合并甲状腺功能亢进症的临床分析与护理对策

  周红慧，李赛春

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 53-54.

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  甲状腺功能亢进症(甲亢)在女性中显著高发(女∶男为4~6∶1)，尤其是年轻女性，妊娠合并甲亢患病率国外报道为0.02%~0.2%^[1]，国内报道为0.1%~0.2%^[2]。本文收集妊娠合并甲亢患者41例，通过积极有效的治疗和护理，取得了满意的效果。现将临床分析及护理对策报道如下。
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  FT₃、FT₄化学发光免疫分析的方法学指标及评价

  黄建荣，薛一峰，蒋华振

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 55-56.

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  近年来，免疫分析技术取得了长足的进展，各种以全自动操作、微量检测、灵敏高效的分析方法如酶免疫分析、化学发光免疫分析(CLIA)、时间分辨荧光免疫分析、电化学发光免疫分析等应运而生，并显示了其广宽的应用前景。本文同时用CLIA和RIA两种检测法对45名正常人和142例甲状腺疾病患者血清标本FT₃和FT₄含量进行了测定，比较和评价两种方法的方法学指标和临床诊断价值。
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  疟原虫MalariaPLDH快速检测技术的临床应用

  杨荣助，尹正留

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 56-57.

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  几种常见检测方法检测TORCH—IgM抗体的比较

  徐明辉，黄梦莎，李若林，李泰阶，劳小霞，秦雪

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 57-58.

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综述
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  瘦素与乳腺癌的关系研究进展

  张金英，林季，颜光涛

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 59-60.

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  乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，在我国乳腺癌发病率占女性恶性肿瘤的7%～10%，仅次于子宫颈癌，近几年呈逐年上升趋势，严重危害女性身心健康。一直以来，肥胖症被认为是乳腺癌的一个危险因素，在乳腺癌的发生中起一定的作用。瘦素(leptin)亦称消脂素，是肥胖基因ob的表达产物，由体内脂肪细胞合成分泌，是包含167个氨基酸的蛋白活性因子。瘦素分为脂肪型(分子量16 kDa的非糖基化多肽)和血清型(含146个氨基酸)两种，且具有4个螺旋结构，其螺旋长度与白介素-2(IL-2)、IL-4及巨噬细胞集落刺激因子十分相似^[1] 。瘦素通过与下丘脑内的特异受体结合而发挥抑制摄食、促进能量消耗的作用。瘦素受体除存在于下丘脑外，还广泛分布于神经、心脏、肾脏、乳房、肺、肝脏、脂肪组织及胰岛细胞表面。
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  ¹³C呼气试验检测肝脏线粒体功能

  曲新华，黄晓璐，蔡铭慈，陈志威，黄钢，严惟力

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(1): 61-66.

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