2009年, 第16卷, 第2期　刊出日期：2009-04-25

  

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临床研究
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  哮喘患者血清RANTES测定的临床意义

  刘中娟，丁金文，李建英，林嘉友

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 65-67.

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  为探讨趋化因子RANTES在支气管哮喘发病中的可能作用，本研究应用ELISA方法测定了30例哮喘患者及20名正常健康人血清RANTES水平。 结果表明，哮喘患者急性发作时血清RANTES水平较对照组显著增高(P＜0.01)。同一哮喘患者急性期血清RANTES水平较无症状期(稳定期)明显升高(P＜0.01)，并且，哮喘患者无症状期RANTES水平与对照组比较无显著性差异 (P＞0.05)。另外，血清RANTES水平与外周血嗜酸细胞总数正相关(r=0.76476， P＜0.01)，与肺功能评价指标FEV₁负相关(r= -0.5474， P＜0.01)。以上结果提示，RANTES可能与哮喘的病理生理过程有关，尤其与哮喘急性发作密切相关。进一步深入研究，RANTES有可能成为哮喘治疗的新的靶点。
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  血清铁蛋白及其他四种肿瘤标志物检测对肺癌的诊断价值

  李立青，董振南，田亚平

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 68-69.

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  研究血清铁蛋白(Serum ferritin，SF)及其他四种肿瘤标志物在肺癌患者中的阳性率有何不同。选取2006年至2007年住院确诊肺癌患者111例，收集血清铁蛋白、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、肿瘤抗原15-3(CA15-3)和鳞癌相关抗原(SCC)的检测结果，并比较其在肺癌中的阳性率。结果表明， 在肺癌中血清铁蛋白阳性率最高，其次是癌胚抗原，其他三种阳性率很低，而血清铁蛋白和癌胚抗原联合起来后阳性率即可提高到84.82%。因此，血清铁蛋白和癌胚抗原联合起来在肺癌诊断中阳性率很高，可以用于肺癌的诊断。
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  乙肝病毒相关原发性肝细胞癌的癌前标志物检测

  张华，项明洁，王文，李永兴，陈华，熊忠秀，朱剑骞

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 70-74.

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  探讨乙肝病毒(HBV)相关原发性肝细胞癌(HCC)癌前标志物的检测及其临床意义。在HBx基因转染的HepG2细胞系中，采用PCR选择性分离cDNA，进行差减杂交，得到5个HBxAg上调基因URG4、URG7、URG11、S15a、Sui1。建立特异ELISA方法，对中国居民及美国的韩国裔移民共1046例(其中慢性HBV感染400例，对照组646例)，检测5个HBxAg上调基因的相应抗体，定其为HBV相关HCC癌前标志物，简称癌前抗体。结果表明，慢性乙肝组、乙肝肝硬化组、HBV 相关HCC组以及HCV 相关HCC组检出癌前抗体的阳性率与正常人群相比均有显著差异(P＜0.01)，且差异随慢性乙肝-乙肝肝硬化-肝癌的发展而增大，而HBV携带组、其它肝炎组以及其他肿瘤组与正常人群相比均无显著差异(P＞0.05)。在5个癌前抗体中，HBV 相关HCC组检出3个或3个以上癌前抗体的阳性率为52.6% (30/57)，乙肝肝硬化组为29.2% (35/120)，慢性乙肝组为19.0%(29/153)，而正常人群仅为0.8%(4/494)。在HBV感染各组病例中，慢性乙肝组癌前抗体阳性率为48.4%(74/153)，乙肝肝硬化组为66.7% (80/120)，HBV 相关HCC组为82.5% (47/57)(P＜0.01)，平均癌前抗体阳性数分别为1.37、2.12和3.52(P＜0.01)。这5个癌前抗体在正常人群中检测不到，而在肝癌及其高危人群中高比例地出现，且阳性率随慢性乙肝-乙肝肝硬化-肝癌的发展而显著升高，反映了这些癌前抗体是肝癌发生的高危风险因子，在肿瘤的发展过程中逐步产生，可以作为癌前病变趋势的诊断依据。
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  乙肝肝硬化患者血清铁蛋白、转铁蛋白水平检测及意义

  张宏，李强，李友生，张志涛，李淑敏，申广文，张贵利，李英欣

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 75-76.

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  为探讨乙肝肝硬化患者血清铁蛋白(FE)和转铁蛋白(TF)的变化，选择68例乙肝肝硬化患者，用放射免疫法检测FE，ELISA法检测TF。结果表明，Child-Pugh各级肝硬化患者FE水平均高于对照组，并依Child-pugh A、B、C分级上升;TF水平均低于对照组，并依Child-Pugh分级下降。提示FE和TF水平一定程度可以反映乙肝肝硬化患者的病变严重程度，过重的铁负荷可能协助乙肝病毒加重肝细胞损伤。
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  胃癌患者血清VEGF水平和与癌组织VEGF表达的关系及临床意义

  王海莉，崔凯，张雪峰，姜秋菊，张继红

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 77-78.

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  探讨胃癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和胃癌组织中VEGF的表达及二者的关系和价值。采用ELISA法测定胃癌患者血清VEGF水平，采用免疫组化SP法检测胃癌组织中VEGF的表达情况。结果发现，胃癌患者外周血中VEGF水平明显高于对照组 (P＜0.01); 胃癌组织中VEGF的阳性表达率明显高于对照组 (P＜0.05)。结果显示，VEGF在胃癌的生长、发展中起到重要作用。血清VEGF水平与胃癌组织中VEGF的阳性表达率有一定的相关性，可以用血清VEGF水平判断胃癌组织中VEGF的阳性表达情况。
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  肿瘤标志物CA19-9、CA242、CA125在胰腺癌诊断和预后评估中的价值

  毛奇琦，严惟力，孙旭，胡尧，钟良

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 79-81.

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  为了评价CA19-9、CA242、CA125单独或联合检测在胰腺癌诊断和预后评估中的作用，对105例确诊的胰腺癌患者，手术前检测血清CA19-9、CA242、CA125值，并检测了70例非胰腺恶性肿瘤患者和30例良性胰腺疾病患者的血清CA19-9、CA242、CA125水平。结果发现，单独应用于胰腺癌诊断时，CA19-9的灵敏度最高，但是其特异性显著低于CA242和CA125(P＜0.01)。联合检测CA125和CA242可使诊断特异性达到92%。CA242高于正常值的胰腺癌患者，其生存期明显短于CA242值正常的胰腺癌患者(P＜0.05)。三项肿瘤标志物中两项以上高于正常值的患者，其生存期显著低于仅有一项高于正常值或三项皆正常的患者(P＜0.05)。CA19-9在胰腺癌诊断率方面优于CA125和CA242。联合使用CA125和CA242可以提高诊断的特异性。肿瘤标志物高水平与胰腺癌进展期相关。三项肿瘤标志物中两项或三项高于正常值的患者其生存期较短。
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  细胞因子及特异性抗体的检测在肾综合征出血热诊断中的意义

  张洁，乔军

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 82-83.

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  探讨检测血清细胞因子及肾综合征出血热(HFRS) 病毒特异性抗体IgM和IgG的含量在HFRS发病机制及诊断中的意义。选择24例HFRS患者及30例健康人血清标本，采用生物素-亲和素-酶免疫技术检测IL-2、IL-6和TNF-α，ELISA方法检测血清HFRS病毒特异性抗体IgM和IgG，并对其进行统计学分析。 结果显示， ELISA法检测HFRS患者抗HFRS病毒IgM和IgG的阳性率分别为75.00 % 和50.00 %，健康对照组的抗体阳性率为零;HFRS患者血清IL-2、IL-6、TNF-α的含量分别为10.88±2.31pg/mL、256.46±102.51pg/mL和45.63±5.32pg/mL，高于健康对照组0.59±0.24pg/mL(P＜0.01)、53.8±19.21 pg/mL(P＜0.01)和5.81±3.58 pg/mL(P＜0.01)。 结论 :HFRS患者血清IL-2、IL-6和TNF-α及血清特异性抗体IgM和IgG的含量较健康人明显升高，检测这些指标对该病发病机理、诊断及预后评价有一定意义。
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  放射免疫法测定抑郁症患者血清脱氢表雄酮变化

  张海三，张红星，孟焱，赵晶媛，杜云红

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 84-87.

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  了解放射免疫法测定血清脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone， DHEA)的可靠性、抑郁症患者DHEA水平及抗抑郁治疗后的变化。选取抑郁症患者及正常对照志愿者各40名，8:00-9:00AM空腹时抽取肘静脉血，放射免疫分析法测定对照组和患者组治疗前后DHEA浓度。结果显示，患者组治疗前血清DHEA水平明显低于对照组( P=0.001)，治疗后明显升高( P=0.000)，且高于对照组( P=0.001);男性组和女性组治疗前后血清DHEA浓度均有显著性差异(P值均为0.000)。结论:放射免疫法测定DHEA简便、可靠、易行，适合临床及研究应用;血清DHEA水平低下可能与抑郁有关，抗抑郁药物治疗后DHEA升高，这种变化与性别无关。
基础研究
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  体外分枝杆菌培养系统检测结核分枝杆菌耐受利福平的系统评价

  马彬，田金徽，李培杰，祝秉东，刘雅莉，杨克虎，康熙雄

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 88-92.

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  用Meta-analysis方法评价非放射性分枝杆菌培养系统检测结核分枝杆菌耐受利福平的准确性。通过检索 PubMed、EMBASE、CBMWeb、CSJD、CJFD数据库和其他方式广泛收集文献。用QUADAS(Quality Assessment of Diagnostic Accuracy Studies)标准评价文献质量。用Meta-Disc软件计算合并灵敏度、合并特异性和SROC曲线等评价非放射性分枝杆菌培养系统的诊断正确性。最终纳入6篇文献。非放射性分枝杆菌培养系统在检测结核分枝杆菌耐受利福平时，均显示了较高的灵敏度和特异性。MB/BacT系统的合并灵敏度=100%，合并特异性=99%。BACTEC MGIT 960检测系统的平均灵敏度=100%，平均特异性=91%， SROC曲线下面积为0.997。 结论: MB/BacT和BACTEC MGIT 960系统在检测结核分枝杆菌耐药(利福平)性方面显示了较高的灵敏度和特异性。推荐使用MB/BacT和BACTEC MGIT 960系统代替BACTEC 460检测系统作为结核分枝杆菌耐药(利福平)性的确诊试验。限于纳入研究的局限性，手工操作的分枝杆菌生长指示管(MGIT)系统的检验效能还有待进一步研究。
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  免疫酶法与ELISA法检测EB病毒VCA-IgA的比较

  阳茂春，陆爱英，李山，李若林，徐明辉，李泰阶，劳小霞，秦雪

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 93-95.

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  为探讨免疫酶法与ELISA在鼻咽癌诊断中的临床价值，检测鼻咽癌组患者与健康对照组血清EB病毒壳抗原抗体，并对两种检测方法的结果进行分析。结果表明: 177例鼻咽癌患者中，免疫酶法检测EB-VCA-IgA阳性率高92.1%(163/177)，而国产试剂和进口试剂ELISA法检测结果阳性率都较低，分别为 65.0%(115/177)和67.2%(119/177)，有显著性差异(P＜0.005);在90名对照组血清EB-VCA-IgA，免疫酶法的阴性率为100%(90/90)，ELISA法中的国产和进口试剂的阴性率分别为:98.9%(89/90)和95.6%(86/90)，无显著性差异(P＞0.05)。为此免疫酶法检测EB-VCA-IgA的灵敏度较高，更适合用于鼻咽癌的普查、协助诊断等，具有实际临床意义。
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  探讨RIA测定甲状腺激素水平的影响因素

  王华新，李云凤，何卫社，李延伟，王红，张海涛，于水江，吴英杰，蔡会欣，孙欣

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 96-98.

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  探讨RIA测定甲状腺激素水平的影响因素(运动、饮食、生物节律、药物)对测定结果的影响。T₃、T₄、FT₃、FT₄为RIA法，TSH为IRMA法。结果表明， 运动、饮食测定结果与对照无显著性差异;轻度脂血对测定结果无影响，重度脂血有影响趋势; TSH昼夜间变化明显， T₃、T₄、FT₃、FT₄无昼夜变化;甲状腺素片对T₃、T₄、FT₃、FT₄测定结果影响明显，他巴唑对测定结果无影响。RIA测定甲状腺激素应试者状态至关重要，是保证检验结果准确性的先决条件，要高度重视。
方法研究
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  血清镁测定候选参考方法的建立及其方法学评价

  王金英，王清涛，马怀安，李惠玲，徐国宾，徐静，贾慧敏，童清

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 99-102.

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  为建立血清镁测定的候选参考方法并对所建立的方法进行评价，采用火焰原子吸收光谱法，将血清用含有一定量的盐酸和氧化镧的稀释液准确稀释到100倍，进行分析与测定。方法学评价显示，重复试验批内不精密度(以变异系数CV表示)为0.41%(0.17%～0.89%); 批间CV为0.79%(0.63%～0.90%);总CV为0.83%(0.69%～0.92%);准确度偏倚小于1.5%;低、高两个水平的平均加标回收率分别为100.31%和99.70%;灵敏度和检出限分别为1.87×10^-3mmol/L和0.0023mmol/L;线性范围为0.5～2.0mmol/L;测量不确定度为0.9859%。在规范操作和严格控制实验条件下，火焰原子吸收光谱法测定血清镁精密度和准确度较高，建议用其作为血清镁测定的候选参考方法。
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  自配试剂在COULTER流式细胞仪检测NK细胞和B细胞中的应用

  徐明辉，陈智平，秦雪，莫武宁，王立秋，李若林，林发全，黄军强，李山

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 103-104.

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  探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。将自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度、稳定性与原装试剂进行对比分析。分析结果显示自配试剂与原装试剂理化性质一致，采用自配试剂测定20份病人标本NK细胞和B细胞并与原装试剂对比，差异无统计学意义(P＞0.05)，两者呈高度正相关r＞0.95。自配试剂稳定性好，放置1年后，与原装试剂分别测定15份标本，结果差异无统计学意义(P＞0.05)，两者呈高度正相关r＞0.91，说明自配试剂完全可以代替美国COULTER流式细胞仪原装进口试剂进行NK细胞和B细胞的检测。
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  氯磺化邻-三联苯的合成与表征

  于春暖，李宏涛，潘利华，王力

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 105-107.

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  以邻-三联苯为原料，经傅氏酰基化反应、酯酮缩合反应和氯磺化反应，合成了双功能螯合剂4，4′-二(1″，1″，1″–三氟-2″，4″-丁二酮-6″-酰基)-氯磺化邻-三联苯(BTBCT)，经红外光谱、熔点、元素成份等表征分析，证实其结构;通过标记技术和荧光光谱分析确认BTBCT具有双向功能。BTBCT与BSA偶联，经UA仪监定后，再与Eu³⁺制成BSA-BTBCT-Eu³⁺。BTBCT可以作为新型固相TRFIA体系的双功能螯合剂。
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  固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中的蛋白质测定

  刘婷婷，宁志刚，赫文龙，李俊玲，张树恒，潘利华

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 108-110.

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  利用新型双功能螯合剂—4，7-二氯磺酰基苯基-1，10-菲啰啉-2，9-二羧酸(BCPDA)进行固相时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)标记技术研究，结合标记牛血清白蛋白(BSA)实验，研究测定蛋白质方法，监测标记过程，计算回收率、标记比。确定考马斯亮蓝染色法为该体系标记研究中测定蛋白质含量方法。
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  三台雅培全自动免疫分析仪测定AFP、CEA水平的可比性研究

  李泰阶，李山，秦雪，董良哲，李若林，徐明辉，陈智平

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 111-113.

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  探讨不同免疫分析仪检测AFP、CEA结果的可比性，为不同仪器检测结果的互认和实验室认可提供依据。依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件方案，收集40例患者不同浓度的新鲜血清，分别在三台仪器进行AFP、CEA检测，以雅培i2000SR为目标检测系统(X)，用两台雅培AXSYM与目标系统进行比对，分析三台仪器检测结果的可比性。结果表明，雅培AXSYM(1)和雅培i2000SR的比对中，AFP浓度小于30 ng/mL、CEA浓度小于15 ng/mL时，预期偏倚和相对偏倚均在允许偏倚之外，结果不能被接受。雅培AXSYM(2)和雅培i2000SR的线性方程和相关系数都很好，结果可被接受。实验室内使用不同检测仪检测同一项目时，应进行方法的比对和偏倚评估，以实现检测结果的可比性。
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  离子交换和亲和层析两种方法对糖尿病大鼠糖化血红蛋白检测的比较

  沈晓霞，李宏亮，刘雪丽，王芃，赵庆莉，李光伟

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 114-116.

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  探讨离子交换和亲和层析高效液相法对糖尿病大鼠糖化血红蛋白检测的影响及比较。应用离子交换法(使用Bio-Rad的Variant II糖化血红蛋白仪)和亲和层析高效液相法(使用Primus的Ultra2糖化血红蛋白仪)对不同血糖水平的Wistar大鼠进行糖化血红蛋白的检测。亲和层析高效液相法检测的总糖化血红蛋白(GHb)随血糖浓度的升高而升高，血糖浓度从3.6mmol/L开始升高，GHb的值从4.4%到16.1%，与血糖的相关性好。离子交换法测定的HbA1随血糖浓度升高而升高，但与血糖相关性不明显。亲和层析高效液相法测定的GHb能较准确的反映糖尿病大鼠糖化血红蛋白水平，可用来评价糖尿病大鼠的血糖变化。
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  自配COULTER流式细胞仪试剂稳质期的探讨

  李若林，陈智平，秦雪，莫武宁，徐明辉，林法全，黄军强，李山

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 117-119.

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  探讨自配美国Coulter 流式细胞仪试剂的稳质期，以便更好地进行推广应用。将自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液保存1个月、2个月、6个月、1年，分别从其外观、理化性质、准确度、精密度和相关性等方面与进口原装试剂进行系统的比较，确定自配试剂的稳质期。自配试剂保存1年，其外观无变化，理化性质与原装试剂基本一致;连续10天测定质控品淋巴细胞亚群表达率，其CV值均小于5%;分别检测20例样本中T细胞亚群表达率，与原装试剂比较，两者结果差异均无统计学意义(P＞0.05)，并且两者结果呈高度正相关，r均大于0.930。这表明自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液试剂的稳质期至少在一年。
研究报告
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  全身骨显像联合血清CYFRA21-1、CEA和CT检测对肺癌骨转移的诊断价值

  张龙奎，王迎秋，牛晓南，刘学军，王力金

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 120-121.

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  肺癌是一种常见的亲骨性恶性肿瘤，骨转移是其最常见的并发症之一，许多患者无骨痛症状时已有转移，一旦出现明显症状，则多数已处于晚期，因此，判断肺癌骨转移，对制订治疗方案、判断预后有意义。全身骨显像是诊断骨转移的方法，通过放射性核素异常分布发现转移灶。细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、CEA和降钙素(CT)是肺癌诊断中常用的肿瘤标志物 ^[1-2]。本文探讨全身骨显像联合检测血清CYFRA21-1、CEA和CT对肺癌骨转移的诊断价值。
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  化学发光法测定519例心肌肌钙蛋白I水平

  陈锋，李杨亮，刘柳

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 121-122.

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  心肌肌钙蛋白I(CTnI)作为心肌损伤标志物，在临床上已应用了多年，由于其高度的心肌特异性，对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期，CTnI已被临床医生及检验人员广泛接受，已取代肌酸激酶同工酶(CK-MB)，不仅成为判断心肌损伤，特别是诊断急性心梗(AMI)的标准。而且已成为判断冠脉综合征患者处于心肌损伤风险的最合适的标志物，CTnI的升高还可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗。
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  两种筛查HIV(1+2)抗体试验的性能比较

  李山，沈德才，李若林，徐明辉，李泰阶，劳小霞，秦雪，陈智平

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 123-124.

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  近年来人类免疫缺陷病毒(HIV)感染率呈上升趋势，成为世界性的防治难题^[1]。因此，在HIV抗体筛查实验室，确保采用高灵敏度的方法和试剂，对预防HIV的传播和控制艾滋病的流行具有重要意义。本文对酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)和微粒子免疫测定法(microparticle enzyme immunoassay，MEIA)检测呈弱阳性反应的结果进行比对和偏差分析，以判断其检测的临床可接受性能，现报告如下。
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  尿液镜检中细菌管型与颗粒管型的鉴别

  孙艳霞

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 125-126.

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  管型的检测对肾脏疾病的诊断、鉴别诊断，病程观察及预后判断等有重要意义。管型的种类很多，其临床意义各不相同。笔者发现在实际工作中细菌管型(bacterial casts)往往被当作颗粒管型(granular casts)报告，错误的报告往往导致临床的误诊。颗粒管型指管型内含大小不同的颗粒物，其量超过1/3面积时称为颗粒管型。颗粒来自崩解变性的细胞残渣，也可由血浆蛋白及其它物质直接聚集于T-H糖蛋白基质中形成。其外形常较透明管型短且宽，呈淡黄褐色或棕黑色，可见于肾实质性病变，如急慢性肾小球肾炎、肾病、肾动脉硬化等，细颗粒管型出现提示肾单位有淤滞现象。细菌管型指管型的透明基质中含大量细菌，在普通光学显微镜下呈颗粒管型状，可借助相差及干涉显微镜仔细识别，常见于肾脓毒性疾病。真菌管型可见于真菌感染时，但辨认困难，常需用细菌学及特殊染色等手段识别。发现此类管型，对原发性及播散性真菌感染，有早期诊断意义，肾盂肾炎反复发做时可检出霉菌管型^[1-3]。因为细菌管型较难辨认，在实际工作中，即使工作多年的检验工作者，发现了细菌管型，也常当作颗粒管型报告，很多时候发现的颗粒管型，有可能有些就是细菌管型。因此，在发现有颗粒管型时，应仔细观察与鉴别，笔者在长期工作实践中，总结了一套细菌学及特殊染色鉴别方法，介绍如下。
质量管理
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  基层医院检验科常见纠纷原因与预防

  孙艳霞

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 126-127.

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  基层医疗单位室间质评活动的几点议论

  李顺今，崔红花

  标记免疫分析与临床. 2009, 16(2): 127-128.

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  室间质量评价(室间质评)是临床实验室对未知样品获得正确结果的能力，检查一个临床实验室检验水平的标尺。通过室间质评可以查找各实验室之间存在的差距，利于相互取长补短，提高检验水平和医疗机构诊断水平有着重要的意义。然而，室间质评活动在基层医疗单位，普遍没有引起足够的重视，以下几个方面的问题需要讨论。