2018年, 第25卷, 第10期　刊出日期：2018-10-20

  

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临床研究
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  骨髓侵犯的高肿瘤负荷滤泡性淋巴瘤患者的血液学特征及疗效分析

  沈 迪1，吴一凡2，王 力1，车轶群1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1413-1418. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.001

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  目的 探讨伴有骨髓侵犯的初治滤泡性淋巴瘤（FL）患者的临床病理特征、治疗及疗效。 方法 回顾性分析2011年3月至2017年5月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的32例伴有骨髓侵犯的FL患者临床资料，总结其临床特点、诊断、治疗方法和疗效。 结果 患者中位发病年龄42岁（27～64岁），男女比例为1:1.14，滤泡性淋巴瘤国际预后指数(FLIPI)评分低、中、高危组分别为2例（6.3%）、16例(50.0%)、 14例（43.8%）。病理分级中，1～2级患者27例（84.4%），3级患者5例（15.6%）。FL患者骨髓侵犯时，外周血白细胞、淋巴细胞比例、乳酸脱氢酶和β2微球蛋白可有不同程度的增高。分析患者骨髓涂片诊断结果，23例患者诊断为非霍奇金淋巴瘤（NHL）细胞白血病，9例患者诊断为NHL骨髓受侵。骨髓增生明显活跃21例（65.6%）。在患者骨髓涂片和外周血涂片中可见到大量淋巴瘤细胞，骨髓幼稚粒细胞、幼红细胞和巨核细胞数量呈相应不同程度减低。32例接受联合化疗患者的总反应率(ORR)为96.9%，完全缓解率(CR)为21.9%，部分缓解率(DP)为75.0%, 疾病进展率（PR）为3.1%。 Ki-67＜50%组较Ki-67＞50%组死亡率略低，中位生存时间略长。结论 伴有骨髓侵犯的FL患者发病年龄较年轻，骨髓和外周血肿瘤负荷较高，使用利妥昔单克隆抗体联合化疗可获得较高的缓解率。
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  PET/CT在原发中枢神经系统淋巴瘤诊断中的价值

  沈智辉，王瑞民，关志伟，王海超，李 灿，徐白萱

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1419-1424. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.002

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  目的 分析18F-FDG PET/CT在原发中枢神经系统淋巴瘤（primary central nervous system lymphoma,PCNSL）中的诊断价值及其影像特点。方法 回顾分析解放军总医院经病理证实的22例PCNSL及21例高级别胶质瘤患者的PET/CT影像表现及临床资料，对两种脑肿瘤的最大标准摄取值（SUVmax）进行比较。结果 22例PCNSL患者中,病理为弥漫大B型20例，外周T细胞型2例；22例PCNSL患者中，单发病变13例、多发病变9例，其中，单发病灶分布于基底节区4例、丘脑3例、脑室内2例、鞍区1例、小脑1例、额叶及颞叶各1例。 22例PCNSL患者PET/CT显像均表现为异常FDG摄取均匀增高，呈结节状、团块状或束带状表现，SUVmax值为：28.70±8.61，其中，12例患者同时行18F-FLT PET/CT联合显像表现为FLT摄取增高，而正常脑皮层一般不摄取FLT，这样就形成了较好的肿瘤与正常脑皮层(T／N)的对比。同机CT以等或高密度为主，CT值为：41.99±4.63Hu，其中4例病变内见坏死区及囊变；继发征象：轻度水肿15例、中线移位10例、脑室受压16例。21例高级别胶质瘤患者PET/CT显像表现为FDG摄取不均匀增高，SUVmax值为：11.37±7.48，病变周围水肿较明显。PCNSL患者的SUVmax高于高级别胶质瘤患者，两者比较差异具有统计学意义（t=1.86, p<0.05）。结论 原发中枢神经系统淋巴瘤在18F-FDG PET/CT显像中具有一定的影像学表现特点，可与高级别胶质瘤进行鉴别，而18F-FLT和 18F-FDG PET/CT联合显像有助于提高PCNSL诊断及鉴别诊断的准确性。
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  阻断Wnt/β-catenin信号通路对补肾活血中药作用后薄型子宫内膜干细胞标志物的影响

  尹晓丹1，2，薛晓鸥2，杨 维1，辛明蔚1，何军琴1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1425-1430. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.003

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  目的 阻断Wnt/β-catenin信号通路对补肾活血中药作用后薄型子宫内膜干细胞标志物的影响。方法 选取薄型子宫内膜患者在确定排卵日后第7～9天，用一次性子宫内膜取样器吸取子宫内膜组织约100mg，处理固定。将取得的内膜组织分离培养子宫内膜干细胞。制备药物血清。将子宫内膜干细胞分为对照组、补肾活血中药高、中、低剂量组、西药组。予药物干预后，将转染T细胞因子（T-cell factor，TCF）的显性负性突变体（dominant negative TCF，dnTCF）表达质粒转染子宫内膜干细胞阻断Wnt/β-catenin信号通路，免疫荧光法检测CD34/CD117蛋白的表达、RT-PCR法检测Oct-4基因、Western blot法检测ABCG2蛋白的表达。结果 转染dnTCF-3阻断Wnt/β-catenin信号通路后，免疫荧光检测结果显示，CD34蛋白的阳性面积与总面积100%相比，中剂量组、高剂量组及西药组表达率较阻断前分别下降20.11%、25.78%、28.89%，差异具有统计学意义（P＜0.05）；CD117蛋白的阳性面积与总面积100%相比，中剂量组、高剂量组及西药组表达率较阻断前分别下降18.11%、24.78%、26.89%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。RT-PCR检测结果显示，Oct-4 mRNA的表达率与总mRNA100%相比，高剂量组、西药组表达率较阻断前分别下降24.96%、24.84%。：Western blot检测结果显示，ABCG2蛋白的表达率与总蛋白100%相比，高剂量组、西药组表达率较阻断前分别下降15.06%、13.24%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 补肾活血中药可能是通过作用于Wnt/β-catenin信号通路来作用于薄型子宫内膜干细胞的。
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  FCGR1A基因检测在呼吸系统感染性疾病中的应用价值研究

  许晓跃，尹秀云，王 淼，徐建民，袁顺宗，金 欣，陈建魁

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1431-1434. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.004

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  目的 探讨呼吸道感染患者的血液中免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ（High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I, FCGR1A）的基因表达水平对细菌、病毒感染的鉴别诊断价值和判别细菌感染类型的应用价值。方法 选取2017年5月至2018年1月我院呼吸道感染患者80例作为研究对象，根据其细菌培养和呼吸道病毒基因检测结果分为细菌感染组和病毒感染组，细菌感染组进一步分为革兰氏阴性细菌（Gram-negative，G-）感染组和革兰氏阳性细菌（Gram-positive，G+）感染组。同时选取健康体检者30例作为正常对照组。对各组FCGR1A基因表达水平进行检测并对检测数据进行统计分析。结果 FCGR1A基因表达水平在正常对照组为2.27±0.77，在病毒感染组为5.41±4.71，在细菌感染组为8.07±5.23，三组之间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。G-细菌感染组和G+细菌感染组分别与正常对照组比较，前二组FCGR1A基因检测水平均高于正常对照组，差异均具有统计学意义（P<0.01），G-细菌感染组和G+细菌感染组FCGR1A基因表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 FCGR1A基因检测可用于诊断鉴别细菌感染与病毒感染，但不能对呼吸道G-细菌感染和G+细菌感染进行鉴别。
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  多种新型心肌标志物在急诊胸痛患者急性冠脉综合征鉴别诊断中的意义

  王丹晨1，秦绪珍1，侯立安1，徐 涛2，卢 洁1，刘 荔1，鲁 军1，邱 玲1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1435-1439. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.005

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  目的 探讨超敏肌钙蛋白T（high sensitivity cardiac isoform of troponin T, hs cTnT）、心型游离脂肪酸结合蛋白（heart-type fatty acid-binding protein, H-FABP）、缺血修饰白蛋白（ischemia modified albumin, IMA）、白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）、白细胞介素-8（interleukin-8, IL-8）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）对急诊胸痛患者急性冠脉综合征的鉴别诊断价值。方法 收集2013年4月至6月北京协和医院急诊主诉为胸痛的56例患者首次检测样本，根据最终诊断将入组患者分为ACS组（30例）、非ACS组（26例），分别检测IL-6、IL-8、TNF-α、H-FABP、IMA、MPO、hs cTnT、cTnI、CK和CKMB。结果 H-FABP与hs cTnT在ACS组和非ACS组具有明显差别，H-FABP、hs cTnT与cTnI具有明显的相关性（r>0.7）。结论 H-FABP、hs cTnT可以用于急性胸痛患者ACS鉴别诊断，与cTnI的相关性良好，且升高幅度较高，能够在早期发现心肌损伤。
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  血液病80例骨髓染色体核型分析

  马 娟，高振奎， 孟 倩， 李 佳， 孙喜明， 赵 瑾， 张 曼

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1440-1444. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.006

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  目的 通过对血液病患者进行骨髓染色体核型分析，为血液系统疾病的诊断、治疗、病情监测及预后判断提供细胞遗传学数据。方法 分别采集2016年5月至2018年6月来自我院各种初治恶性血液系统疾病患者的80例骨髓样本，骨髓细胞经过短期培养和G显带法进行染色体核型分析。结果 检出染色体异常34例,异常率42.5%。结论 染色体核型分析为血液病诊断、治疗、病情监测及预后判断提供了必不可少的依据。
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  CK19、Galectin-3、HBME-1、TPO和CD56在甲状腺乳头状癌病理诊断中的价值

  位嘉，赵丽华，槐英丽，张晓敬，林秋兰，王克杰，闫红燕，郭家良

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1445-1449. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.007

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  目的 探讨CK19、galectin-3、HBME-1、TPO和CD56在甲状腺乳头状癌（PTC）病理诊断中的应用价值；方法 采用免疫组化EnVision法检测上述5种标志物在159例PTC和61例甲状腺良性病变中的表达情况。结果 PTC组织中CK19、Galectin-3和HBME-1的阳性表达率（100%，100%，79.2%）显著高于甲状腺良性病变组（45.9%，19.7%，9.8%），TPO和CD56的阳性表达率（11.9%，11.9%）显著低于良性病变组（98.4%，88.5%），差异具有统计学意义（P<0.05）；5种标志物单独用于PTC的诊断时，CK19和Galectin-3的灵敏度（100%）最高，TPO的特异性（98.36%）最高，Galectin-3的准确度（94.55%）最高；多种标志物联合应用时，以CK19、Galectin-3、HBME-1和TPO四项中任意三项支持PTC或5项中任意三项支持PTC作为诊断PTC的标准时准确度最高，均达到97.27%。结论 CK19、galectin-3、HBME-1、TPO和CD56是诊断PTC的重要标志物，其联合应用有助于形态不典型PTC与甲状腺良性病变的鉴别诊断。
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  免疫组化、特染套染技术在硬化性胆管炎病理诊断中的应用

  杨江辉，李 莉，于 燕, 张兆浩,雒文英, 李 勇, 高国强,尹洪芳

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1450-1452. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.008

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  目的  探讨免疫组化、特染套染技术在硬化性胆管炎（sclerosing cholangitis，SC）病理诊断中的应用价值。方法  通过对10例临床送检肝穿诊断为硬化性胆管炎组织标本，分别进行CK7染色、Masson染色和CK7+Masson套染，对比观察分别染色和套染对病理医师诊断的影响。结果  对硬化性胆管炎病例采用免疫组化、特染套染技术，具有定位准确、结果稳定可靠、制片效果好、便于病理分析与判断等特点。结论  免疫组化、特染套染技术在硬化性胆管炎病理诊断中的应用，更便于病理医师观察病变组织胆管及其周围纤维化程度，为病理医师诊断提供可靠的诊断依据。
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  北京地区TORCH流行病学调查研究

  李荣海1，陈 勋1，韩文端2，黄欲晓3，史宇思3，刘文娟1，吴 晶1，杜 娟1，郭慧娟1，尚晓泓1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1453-1459. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.009

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  目的 分析北京地区TORCH感染情况及流行特点。方法 对2429例TORCH结果进行回顾性分析。按性别、年龄及抗体浓度水平进行分组，用SPSS进行统计分析。结果 CMV IgG、RV IgG、HSV-I IgG总阳性率较高。女性CMV IgM、RV IgM、Tox IgG阳性率显著低于男性（P＜0.05），其它抗体阳性率间无性别间差异。女性在50～78岁年龄组中，CMV IgG、HSV-I IgG阳性率均高于16～29岁、30～34岁、35～49岁三组（P＜0.01）；RVIgG在16～29岁组的阳性率高于其他三组，50～78岁组的阳性率低于其他三组（P＜0.01）。女性同一个体HSV-I IgG、RV IgG、CMV IgG同时两种抗体阳性者合计578例（占27.33%）；三种抗体共同阳性者为1446例（占68.37%），且三种抗体共同阳性个体中在不同年龄段中的阳性率无统计学差异。结论 北京地区男女TORCH感染阳性率不同，女性在50-78岁年龄组，CMV IgG、HSV-I IgG阳性率显著高于低龄组，随着年龄的增长，RV IgG阳性率呈下降趋势，且CMV IgG高浓度水平抗体所占比例逐渐增大，而RV IgG所占比例逐渐减小。
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  HBV前S基因突变与HBV感染者慢加急性肝衰竭的相关研究

  马建和1,2,徐 飞1,2,王雅杰1,2

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1460-1463. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.010

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  目的 探讨HBV前S区位点变异与慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure, ACLF）之间的关系。方法 共收集80例患者样本，其中40例HBV相关ACLF 患者为研究组，40例慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者为对照组。采用聚合酶链反应及基因测序的方法对患者血清标本的HBV前S区基因位点突变进行检测，分析ACLF发生与HBV前S区位点突变的关系。结果 CHB患者病毒载量平均值为1.18 × 105 copies /ml，ACLF患者病毒载量平均值为1.03 × 107copies/ml；对照组中的CHB患者基因型均为C型。ACLF患者基因型分别为B型14例(14/40)，C型26例(26/40)。共有27个核苷酸位点在ACLF患者发生显著变异，其中I108F、I108M、C120M、A158V和A172V为ACLF常见突变位点。在40例ACLF患者中的突变发生率分别为62.5% (25/40)、55%(22/40)、65%(26/40)、77.5%(31/40)、67.5% (27/40)，显著高于CHB患者（P<0.05 F = 31.6，P = 0.0432）；对HBV患者B、C基因型的突变分析发现， I108M、A158V这2个位点在B基因型ACLF组中突变显著高于CHB组；I108F、V154A和 A172V这3个突变在C基因型ACLF组中显著高于CHB组。I108( M /F)、A158V这2个位点突变在B基因型显著高于C基因型CHB患者。ACLF组中的C2875、G3191、C105位点变异高于CHB组。HBV相关的ACLF患者与CHB患者在ALT水平升高方面无明显差异。总胆红素水平及凝血酶原活动度比值两者有明显差异(P<0.05 F = 24.31，P = 0.046；P<0.01 F = 85.68，P = 0.006)。结论 HBV基因中I108( M /F)与A158V核苷酸突变与ACLF 密切相关；HBV S区的突变对于ACLF发生起着重要作用，可为ACLF的发病提供重要的参考依据。
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  99Tcm-tetrofosmin细胞结合实验早期评价鼻咽癌细胞放疗疗效的试验研究

  周 敏1，李继会2，邓胜明2，刘 辉3，郑 健1，索艳君1，田大龙3，章 斌2

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1464-1468. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.011

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  目的 通过测定放疗前及不同剂量放疗后24h的99Tcm-tetrofosmin(99Tcm-TF)细胞结合率，与肿瘤增殖指标比较分析，从细胞学水平验证99Tcm-TF早期评价鼻咽癌放疗疗效的可行性。方法 (1)通过γ测量仪进行测量经胰酶消化的细胞和上清液每分钟的计数次数（CPM计数），计算99Tcm-TF的细胞结合率。(2)测量给予0、2、4、8 Gy单次照射CNE-1细胞的99Tcm-TF结合率。(3)通过酶标分析仪上的492nm波长检测给予0、2、4、8 Gy单次照射的CNE-1细胞的光密度(OD)值，计算细胞生长抑制率。(4)过流式细胞仪进行检测放疗后各组细胞早期凋亡率。结果 (1)与对照组相比，照射各组的OD值均出现下降，2、4及8Gy组细胞生长抑制率分别为(7.14±1.86)%、(17.44±2.21)%及(33.54±3.51)%，各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05)。细胞生长抑制率随照射剂量的加大而增加，两者呈正相关(r=0.945，P＜0.01)。(2)细胞早期凋亡率和照射剂量呈正相关(r=0.969，P＜0.01)。(3)99Tcm-TF细胞结合率与照射剂量呈负相关(r=–0.805，P＜0.01)。结论 CNE-1细胞经不同剂量射线照射后24h，细胞生长受到抑制，早期凋亡率和细胞生长抑制率与照射剂量呈正相关，99Tcm-TF细胞结合率出现降低，与细胞生长抑制率呈负相关，该研究结果从细胞学水平证实99Tcm-TF可以早期评价鼻咽癌放疗疗效。
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  ERCC1基因多态性与肝癌的相关性研究

  黄玉亮，吴君荣，赵惠柳，黄昭东，梁艺华，黄玲莎，朱 波

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1469-1475. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.012

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  目的 探讨核酸切除修复基因1(ERCC1)的单核苷酸多态性（SNP）与肝癌易感性的相关性，并研究ERCC1基因多态性和肝癌组织ERCC1蛋白表达的关系。方法 本研究纳入肝细胞癌患者及对照组各65 例，采用SNaPshot技术对ERCC1基因rs735482，rs1046282，rs3212948三个多态性位点进行基因分析，免疫组织化学方法检测肝癌组织ERCC1蛋白表达，卡方检验分析上述三个多态性位点基因型在研究对象中的分布情况与及其与肝癌组织ERCC1蛋白表达的关系进行分析，非条件Logistic回归分析法对以上三个SNP 位点等位基因和基因型频率与肝癌的发病风险关系进行分析，以P＜0.05表明存在统计学差异。结果 对照组中三个多态性位点基因型分布均符合哈温平衡规律。病例组ERCC1基因rs1046282位点基因型频数分别为：CC为8(12.31%)，CT为30(46.15%)，TT为27(41.54%)；对照组该位点基因型频率分布：CC为22（33.85%），CT为25（38.46%），TT为18（27.69%），CC、CT、TT基因型在两组中的频数分布差异具有统计学意义P=0.012；T等位基因在病例组中的分布频率高于对照组(P=0.004)；与CC基因型比较，携带至少1个突变等位基因T(CT+TT)的个体发生肝癌的风险增加了2.218倍(P=0.017)。rs3212948和rs735482位点单核苷酸多态性与肝癌患病风险性不存在相关性（P＞0.05），以上三个位点的单核苷酸多态性与肝癌组织ERCC1蛋白的表达无相关性(P＞0.05)。结论 ERCC1基因rs1046282位点多态性与肝癌易感性相关，且携带突变T等位基因比携带C等位基因患肝癌的风险率高。尚未发现ERCC1基因rs735482，rs3212948位点突变与肝癌的发病风险存在相关性，这三个位点单核苷酸多态性与肝癌组织ERCC1蛋白表达不相关。
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  鼻咽癌癌组织中CD133的表达情况与放疗预后的关系研究

  蔡润茁，曾令达，李登辉，朱丽明

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1476-1479. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.013

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  目的 分析鼻咽癌癌组织中CD133的表达情况与放疗预后的关系。方法 选取我院2013年7月至2015年6月期间收治的经病理活检确诊的初治鼻咽癌患者50例，采用免疫组织化学染色方法分析活检的鼻咽病变组织CD133蛋白表达情况，然后行常规放射治疗，原发灶剂量68~72 Gy，评估放疗近期疗效，并进行预后随访。结果 ①CD133蛋白在鼻咽癌组织中呈高表达，表现为胞膜及胞质呈棕色阳性染色，且阳性表达率68.00%。②CD133蛋白在鼻咽癌组织中的表达与TNM分期、淋巴结转移及放化疗疗效有关（P＜0.05），与年龄、性别等无关（P＞0.05），其中CD133蛋白阳性表达者放疗后RR 为61.76%明显低于阴性表达者的93.75%（P＜0.05）。③CD133蛋白阳性表达者放化疗后3年总生存率、无进展生存率分别为 67.65%、35.29%明显低于阴性表达者的93.75%、68.75%（P＜0.05）。结论 CD133作为鼻咽癌干细胞较特异的表面标志物，在鼻咽癌组织呈高表达，与肿瘤病理特征密切相关，且可作为放疗预后的预测指标。
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  原发性肝癌超声造影参数与血管内皮生长因子、CD90表达的相关性研究

  董子秋

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1480-1484. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.014

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  目的 分析原发性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）超声造影参数与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、CD90表达的相关性。方法 回顾性分析60例经病理证实的原发性肝癌患者的超声造影表现，免疫组织化学检测VEGF、CD90的表达，分析VEGF、CD90阳性与阴性肝癌与始增时间、达峰时间、峰值加速时间、始增速度及增强速率的关系。结果 病灶的始增时间、达峰时间、峰值加速时间小于病灶周围背景肝组织，病灶始增速度、增强速率大于病灶周围背景肝组织，差异有统计学意义（P<0.05）。VEGF表达阳性率81.21%（87/107），CD90表达阳性率73.83%（79/107），两者表达呈正相关（r=0.264，P=0.001）。VEGF、CD90阳性HCC的始增时间、达峰时间、峰值加速时间小于VEGF、CD90阴性HCC，VEGF、CD90阳性HCC始增速度、增强速率大于VEGF、CD90阴性HCC，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 CEUS可判定PHC不同血供灌注特征并与VEGF、CD90密切相关，对肝癌诊断与治疗具有重要临床价值。
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  Stanford A型主动脉夹层患者中α-1抗胰蛋白酶表达水平及意义

  李继军1，田爱丽1，吕会斌1，朱生睿1，陆树洋2，亚尔麦麦提.穆萨1，阿迪力江.居麦1，夏利民1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1485-1488. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.015

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  目的 本研究旨在探讨Stanford A型主动脉夹层患者中α-1抗胰蛋白酶（α-1 antitrypsin，α-1 AT）表达水平及临床意义。方法 收集所有2015年1月至2017年1月在我院行手术治疗的 Stanford A 型主动脉夹层、升主动脉瘤患者的升主动脉血管组织标本；正常血管组织标本取自心脏移植供心修剪下来的升主动脉血管组织。采用RT-PCR、Western blotting和免疫组化方法检测α-1 AT表达情况。结果 RT-PCR和Western blotting结果显示，Stanford A 型AD组α-1 AT mRNA和蛋白表达水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；升主动脉瘤组α-1 AT mRNA和蛋白表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。免疫组织化学染色结果显示，Stanford A 型AD组α-1 AT蛋白表达阳性率低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；升主动脉瘤组α-1 AT蛋白表达阳性率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论  Stanford A型主动脉夹层患者中α-1 AT表达下调，α-1 AT与Stanford A型AD发生、发展密切相关，可能对血管的完整性起到潜在的保护作用，但具体机制有待进一步探索和验证。
基础研究
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  循环游离DNA检测用血量的改进及其临床应用

  王 迪1，刘慧颖2，阳振曦1，张 岳1，车轶群1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1489-1494. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.016

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  目的 从少量肿瘤患者血液中提取循环游离DNA （cfDNA）并检测其与肿瘤相关的基因突变。方法 选用8例肿瘤患者血常规项目检测完成后剩余的EDTA抗凝全血，采用优化双离心法得到少量血浆并检测cfDNA浓度，对在检测范围内的标本进行建库和靶向外显子捕获，采用 Agilent 2100 bioanalyzer 进行构建文库的质量检测，随后采用HiSeq 3000 Sequencing System进行测序，对测序结果进行质量检测（GC Bias 检测、Quality by Cycle 检测和 Insert Size 检测），随后进行突变分析。结果 通过优化双离心法可以从2mL血常规检测剩余血液中提取血浆，在这小于1mL的少量血浆中可以提取到浓度合格的（cfDNA11.2-58.3ng/?L），构建文库及测序结果均质量合格，并成功检测到cfDNA中肿瘤相关的的基因突变。结论 可以从肿瘤患者血常规检测项目完成后的剩余血液中检测到cfDNA中的基因突变，大大方便了液体活检在肿瘤患者既往留存的血液标本和患者预后随访留取的血液样本中的应用，可以更好对肿瘤患者的基因谱变化进行动态监测及评估。
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  利用多位点序列分型方法对CRKP分型的初步研究

  徐建民,梁钰英,蒋 虔,杨 哲,张 颖,陈水平,袁顺宗,尹秀云,陈建魁

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1495-1498. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.017

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  目的 调查我院耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae，CRKP）分子分型特征，分析其同源性，为院内感染控制提供依据。方法 收集我院2017年10月~12月，经改良Hodge实验（modified Hodge test，MHT）筛选为阳性的肺炎克雷伯菌95株。采用多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)技术，通过PCR扩增和核酸序列分析获得7对管家基因序列，将结果在MLST网站进行比对获得序列型（sequence type，ST）。结果 95株CRKP可分为9个序列型，分别为ST1、ST11、ST15、ST152、ST11030、ST1198、ST1254、ST2260、ST2928。其中ST11型占91.6%（87/95）,为我院主要流行序列型。结论 我院重症医学科、ICU、内科监护病均房存在ST11耐药菌的流行，MLST可用于临床CRKP的分子分型。
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  99Tcm-c(RGD)2在荷不同肿瘤裸鼠体内的生物分布及显像研究

  申镐源，庞小溪，刘敏,杜毓菁，闫平，王荣福，张春丽

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1499-1503. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.018

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  目的 利用放射性核素99Tcm标记的新型环RGD肽二聚体，即c(RGD)2，在荷人脑胶质瘤U87裸鼠、荷人肝癌细胞HepG2裸鼠、荷人宫颈癌细胞Hela裸鼠模型中进行生物分布实验及肿瘤显像研究，以探讨该探针用于整合素αvβ3受体高表达的肿瘤早期特异性诊断的前景。方法 采用氯化亚锡直接标记法将99Tcm标记于c(RGD)2，标记产物经SephadexG10分离纯化，建立荷U87、HepG2、Hela裸鼠模型，分别进行体内分布实验及肿瘤显像研究，分析99Tcm-c(RGD)2在不同肿瘤中的摄取差异。结果 99Tcm-c(RGD)2在三种肿瘤模型中，肿瘤/心脏、肿瘤/脾、肿瘤/血液比值较高。而肿瘤/肾和肿瘤/膀胱比值较低，均小于1。其余脏器组织的T/NT比值增高不明显。荷U87瘤裸鼠和荷HepG2裸鼠尾静脉注射显像剂0.5 h后即可见肿瘤显影，且边界清晰。随时间延长，至6 h肿瘤显影更加清晰。在荷Hela裸鼠中肿瘤显像不清晰，腹部脏器显影呈浓聚。对99Tcm-c(RGD)2在三种肿瘤中的摄取值进行方差分析，并选择常用的Bonferroni法进行进一步的两两组间比较。结果三组间均值两两比较差异P值均<0.05，有统计学意义。结论 99Tcm-c(RGD)2主要经泌尿系统排泄，且血液清除率快，在重要脏器如心脏、肝脏摄取较低。探针对U87和HepG2肿瘤均展示出靶向性及良好的显像特性，其中对脑胶质瘤U87有更好的生物分布及显像结果。而在Hela中显像及生物分布结果并不理想。
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  探讨磁珠偶联血型抗体过程对抗体活性的影响

  程 福1,2,杨 璐1 杨冬梅2,黄远帅2,汪德清1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1504-1506. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.019

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  目的 探讨磁珠与血型抗体偶联过程对抗体活性的影响，为后续利用液相芯片技术检测血型提供实验依据。方法 分别将抗D血型抗体直接或者利用抗人IgG间接与磁珠偶联，再利用磁力架、显微镜观察其与D抗原阳性红细胞的反应情况。结果 IgM型抗D与磁珠偶联后与D阳性红细胞可反应，但IgG型抗D与磁珠偶联后与D阳性红细胞不反应；利用抗人IgG作为桥联间接偶联磁珠的IgG型抗D不能与D阳性红细胞结合；IgG型抗D与D阳性红细胞形成的抗原抗体复合物与磁珠可进一步偶联。结论 血型抗体与磁珠偶联后会对其活性产生一定影响，尤其是IgG型血型抗体。
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  慢病毒介导的低表达FTH前列腺癌稳转细胞株的构建及功能分析

  赵慧君，张 曼

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1507-1511. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.020

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  目的 构建并鉴定慢病毒介导的低表达铁蛋白重链（FTH）的前列腺癌PC-3M稳转细胞株，为深入探讨FTH在前列腺癌中的作用机制提供理论依据。方法 感染实验分为3组:空白对照组(未经处理的PC-3M细胞),阴性对照组(感染NC病毒),LV-shFTH组（感染shFTH病毒）。运用慢病毒感染PC-3M细胞获得稳定的低表达FTH的细胞株,利用Western blot方法检测稳定细胞株中FTH的表达水平，平板克隆形成法检测稳转细胞的增殖能力，Transwell实验检测稳转细胞迁移能力。结果 通过嘌呤霉素的筛选,成功获得了稳定低表达FTH的细胞株。与对照组细胞相比,低表达FTH的细胞增殖慢，迁移率低。结论 成功构建低表达FTH的PC-3M稳转细胞株,为后期验证FTH的生物学功能奠定了物质基础。
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  循环血肿瘤DNA含量变化对评价兔VX2肿瘤放疗早期反应的动物实验研究

  车莉萍1，夏士安1，孙高峰2，王 涛2，李 潇2，张桉瑜2，程 超2，左长京2

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1512-1516. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.021

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  目的  观察外周血循环Shope病毒DNA含量变化比较VX2移植瘤放疗早期治疗效果，探讨液态活检技术在临床的潜在应用价值。方法  采用组织块大腿外侧皮下接种法建立兔VX2肿瘤模型，随机分为实验组和对照组，实验组给予单剂量20Gy放射治疗。根据已知的Shope病毒基因库设计Shope病毒特征性探针，应用实时定量PCR法检测放疗前1天、放疗后第3天及放疗后第7天血浆中Shope病毒特征性DNA片段含量。于放疗后第7天留取肿瘤组织块行病理组织学分析肿瘤细胞坏死率，分组标准以肿瘤细胞坏死率达80%为界，≥80%者为放疗有效组，小于80%为放疗抵抗组。采用SAS 9.1统计软件分析，循环血shope病毒DNA含量组间差别采用方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果  根据病理肿瘤坏死率分组，对照组n=4，有效组n=6，抵抗组n=6。病理分析发现放疗有效组肿瘤组织存在大量坏死灶，放疗有效组坏死率明显高于放疗抵抗组（P＜0.05）；放疗后3天，有效组的循环血shope病毒DNA含量明显高于抵抗组（P＜0.05），放疗后7天，放疗有效组循环血shope病毒DNA含量明显低于抵抗组（P＜0.01）。外周血中shope病毒的动态变化与VX2肿瘤放疗早期病理改变相关。结论  循环血Shope病毒DNA可以作为兔VX2肿瘤特征性肿瘤标志物，循环血肿瘤DNA变化在早期监测肿瘤放疗疗效时具应用价值。
  
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  TLR4在Hela细胞有丝分裂中的定位特点及其与微管的相互作用研究

  王咏红，申 晨

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1517-1521. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.022

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  目的 Toll样受体4（toll like receptor 4,TLR4）是固有免疫的重要成员，主要在吞噬细胞表面发挥免疫应答作用。然而，TLR4在非专职吞噬细胞的细胞表面定位较少，主要定位在细胞内。同时，TLR4在肿瘤组织表达较高，可能参与了细胞增殖的调控，然而其在细胞周期中的分布特征尚不清楚。方法 本研究采用免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察的方法对TLR4在宫颈癌上皮细胞系（Hela）的亚细胞定位进行了探讨；通过免疫荧光共定位实验探讨TLR4与微管蛋白的亚细胞定位的一致性；并应用免疫共沉淀实验研究TLR4与微管蛋白之间可能的相互作用。结果 本研究发现TLR4主要在细胞浆内呈现点状/细颗粒样分布；进一步观察发现TLR4在细胞有丝分裂的过程中显示出纺锤体的形态。随后，通过免疫荧光共定位实验证实TLR4与微管蛋白的亚细胞定位较为一致；同时，免疫共沉淀实验证实TLR4与微管蛋白能够以蛋白复合体存在。结论 本研究结果提示TLR4可能通过对有丝分裂中纺锤体功能的调控参与细胞周期和细胞增殖的过程，为进一步揭示TLR4参与细胞周期和调控细胞增殖的生物学功能拓展了思路。
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  microPET大鼠循经迁移线显像初步研究

  郝美娜1,李 艳2，张彦彦3

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1522-1524. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.023

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  目的 探讨利用微型正电子发射断层显像（micro positron emission tomography system，microPET)显示示踪剂18F-FDG足三里穴位和非穴位注射后沿经脉走行的循经迁移线。方法 将10只大鼠随机分为穴位组和非穴位组,分别将0.03～0.1mL约200～300μCi的18F-FDG注入大鼠足三里穴位和足三里穴位旁非穴位，microPET分别进行PET图像和CT图像采集，将PET图像和CT图像融合并重建融合后的三维图像。结果18F-FDG经穴位注射后能显示循经迁移线，获得功能、代谢信息，非穴位注射后仅显示局部的放射性淤积，未见到明显上行的迁移线。结论 经穴位注射18F-FDG是沿经迁移线显像可行性方法,通过PET显示经脉的形态、功能、代谢状态。
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  DcR3表达对宫颈癌侵袭和转移的影响及机制研究

  邱厚匡，董 殊，许 鸣，李 博，孙 亮，李 婕

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1525-1529. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.024

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  目的 研究诱饵因子3(decoy receptor 3, DcR3)在宫颈癌细胞株中的表达，并在体内体外探讨其对Caski细胞侵袭转移的影响以及作用机制。方法 Western-blot用于检测DcR3蛋白在HeLa、Caski宫颈癌细胞株及1株永生化人宫颈上皮细胞H8中的表达水平。胰酶消化呈对数生长期的Caski后铺置6孔板中，采用沉默慢病毒感染Caski，分为sh-DcR3组和sh-NC组，Western-blot检测沉默Caski细胞中DcR3基因的表达后，体外采用boyden实验检测细胞侵袭能力；transwell小室实验检测细胞转移能力；体内实验经尾静脉注射构建宫颈癌裸鼠转移瘤模型，观察DcR3对Caski细胞在裸鼠内转移能力的影响；Western-blot法检测STAT3以及下游蛋白MMP-7?的表达情况。结果 Western-blot检测发现DcR3在宫颈癌细胞株Hela（7.81±0.11）、Caski（10.96±0.14）中的表达显著高于永生化人宫颈上皮细胞H8（1.00±0.02）（P<0.05）；沉默Caski细胞中DcR3的表达后，与sh-NC组相比，DcR3蛋白表达量明显降低（P<0.05），细胞的侵袭和转移能力显著减弱（P<0.05）；尾静脉注射sh-DcR3的裸鼠肺转移灶的个数显著少于sh-NC细胞。STAT3以及下游蛋白MMP-7的表达量显著降低（P<0.05）。结论 DcR3基因可能是通过调控STAT3/MMP-7?信号通路，促进宫颈癌细胞Caski侵袭转移。
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  扁塑藤素通过调控自噬促进人胶质母细胞瘤U251细胞凋亡

  徐高峰，鲍 钢，白晓斌，祁 磊，谢万福，李瑞春

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1530-1535. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.025

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  目的　探讨扁塑藤素对人胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的影响。方法　2μmol/L、4μmol/L和8 μmol/L的扁塑藤素处理U251细胞24 h后，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测U251细胞活力；AnnexinV-PI双染法检测U251细胞凋亡率；免疫印迹法检测促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达水平。结果　2μmol/L、4μmol/L和8 μmol/L的扁塑藤素呈浓度依赖性地降低U251细胞活力。扁塑藤素处理U251细胞可显著增加凋亡细胞数量以及上调Bax蛋白表达水平。本研究还发现扁塑藤素处理后，U251细胞Beclin1蛋白表达水平以及LC3II/LC3I的比值明显降低。结论　扁塑藤素可能通过抑制自噬促进人胶质母细胞瘤的细胞凋亡。
方法研究
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  放射免疫分子探针131I-PD-L1 mAb的制备及体内显像实验

  庞小溪，廖栩鹤，杜毓菁，张炳晔，刘 萌，王荣福

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1536-1541. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.026

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   目的 研制新型放射免疫分子探针131I-PD-L1 mAb，在探索分子探针理化性质及体内安全性的基础上，开展荷瘤裸鼠在体靶向显像研究。方法 优化放射性核素碘-131[131I]标记抗人PD-L1单克隆抗体（mAb）的标记条件，测定分子探针131I-PD-L1 mAb在不同环境下的稳定性，并观察其急性毒性反应与致热原。静脉单次给药后，按不同时间点抽血测放射性计数，根据非房室统计矩模型进行曲线拟合并计算药动学参数。建立荷U87裸鼠模型，进行体内肿瘤靶向性显像研究。结果 分子探针131I-PD-L1 mAb的标记率为80.21%±2.98%，放射化学纯度达（96.51±1.10）%。131I-PD-L1 mAb的放化纯在72h内均大于92%，放射稳定性良好，且亲水性较强（LgP=-2.51±0.39）。该探针无急性毒性反应及致热原。半衰期T1/2与血药浓度-时间曲线下面积AUC0-inf分别为15.53 h与814.16 kbq/mL×h。荷瘤裸鼠体内显像结果显示：荷U87实验组的肿瘤部位可见清晰显影，144h时肿瘤/非肿瘤（T/NT）比值达10.32±0.78（n=3）；而阻断组的肿瘤部位未见明显放射性浓聚，T/NT比值分别为1.14±0.20（n=3）。结论 131I-PD-L1 mAb标记简单，放化纯高，稳定性良好，特异性显像效果良好，体内应用安全，有望进一步应用于肿瘤的放射免疫显像与治疗研究。
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  抗刚地弓形体单克隆抗体制备鉴定及初步应用

  闫文娟，崔京涛，解宏杰，张伟红，王巧凤，许少侠，倪安平

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1542-1546. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.027

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  目的  制备抗弓形虫特异性单克隆抗体并初步应用。方法  弓形虫RH株体外细胞培养增殖、纯化后灭活并超声波破碎免疫BALB/c小鼠，小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合。酶免法筛查阳性杂交瘤并局限性稀释法进行克隆。免疫荧光、组化及印迹对筛选后的克隆进行鉴定，最终获得的杂交瘤制备腹水并使用Protein G进行纯化。 结果  2只小杂交瘤融合后初步筛查出约80株阳性克隆。剔除与其它抗原有交叉反应、抗体效价低的克隆，最终获得抗弓形虫单抗杂交瘤1株，即14H4-1。免疫荧光和免疫组化显示该株单抗与弓形虫RH具有良好的反应性，免疫印迹试验显示与弓形虫28kDa抗原条带结合。14H4-1单抗免疫球蛋白亚型为IgG1， Protein G纯化腹水后的单抗效价1:12800。 14H4-1单抗已应用排除2例弓形虫感染疑似诊断。结论  制备的抗弓形虫单克隆抗体性能良好，可应用于弓形虫感染病原学检测。
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  罗氏e601环孢霉素试剂的性能验证与方法学比较

  韩 松1，秦绪珍1，张瑞丽1，李 明1，高 冉1，赵晓涛2，齐志宏1，邱 玲1

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1547-1551. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.028

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  目的 评价罗氏公司Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪(e601)环孢霉素试剂的分析性能。探讨化学发光微粒子免疫分析(chemiluminescencemicroparticle immune assay，CMIA)、酶放大免疫分析（enzyme multiplied immunoassay technique，EMIT）与电化学发光免疫分析(electrochemoluminescence immunoassay，ECLIA)三种免疫分析系统环孢霉素血药物浓度检测结果的相关性和一致性。方法 依照美国临床和实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）文件对e601环孢霉素试剂盒进行精密度、正确度、批号间稳定性、方法学比较的性能验证。结果 e601环孢霉素分析系统检测全血样本的批内精密度和实验室内精密度与厂家说明书声明的精密度一致；偏倚小于RCPA对于CsA评价标准；不同批号试剂间的Pearson相关系数r=0.988，回归方程Y=1.0619X+6.7916。三种检测方法的相关性好，ECLIA与EMIT、CMIA方法的相关系数分别为0.974,0.930。ECLIA的检测结果稍高于CMIA、EMIT（差值均数分别为5.0ng/mL，5.1ng/mL）。结论 e601环孢霉素试剂盒符合厂家声明的性能参数，三种方法检测环孢霉素血药浓度相关性良好。
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  人血清肌红蛋白含量的胶体金免疫比色法初步研究

  孙 宇，王 茹，顾李霖，李佳林，王会中

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1552-1555. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.029

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  目的 初步建立一种基于胶体金均相免疫比色技术定量检测血清中肌红蛋白（myoglobin，Myo）的方法。方法 制备直径80nm左右胶体金颗粒并标记Myo抗体，利用胶体金标记抗体与样本中Myo抗原结合后导致胶体金溶液颜色变化且变化程度与结合量呈比的原理，通过检测结合前后540nm与660nm处吸光度的变化进行肌红蛋白的定量。结果 制备的胶体金颗粒液相分布均匀，胶体金颗粒标记抗体呈现均相分布，符合检测实验要求。建立了胶体金均相免疫比色检测肌红蛋白的方法，与化学发光方法的检测结果符合率达95.10%。结论 初步完成了肌红蛋白的胶体金免疫比色法的建立，与成熟的化学发光方法检测结果具有一定的符合性，有必要进行更深一步的研究。
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  制备人工抗原提呈细胞促进NK细胞增殖和抗肿瘤效应的研究

  吴凌娟，张 磊，蔺广义，沈 磊

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1556-1561. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.030

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  目的 制备双表达CD86和4-1BBL的人工抗原提呈细胞，建立在体外大量的扩增具有较高杀伤活性的人NK细胞的有效方法。方法 将表达CD86和4-1BBL的慢病毒感染K562细胞，制备成人工抗原提呈细胞（aAPC），与人外周血单个核细胞（PBMC）共培养，使NK细胞在体外大量扩增。结果 在培养d15天时，细胞数量达到2.7×1010个，CD3-CD56+细胞纯度达到99.4%，细胞体外杀伤活性为96.27±1.27%；在小鼠肺癌模型中，治疗组比对照组肿瘤体积明显减小。结论 成功制备了有效扩增NK细胞的人工抗原提呈细胞（aAPC），建立了在体外高效扩增具有较高杀伤活性的NK细胞的有效方法，为肿瘤和慢性感染性疾病的过继细胞免疫治疗奠定了基础。
质量管理
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  参加美国病理家协会常规化学能力验证的不合格原因分析与探讨

  刘 娜，胡 梅，贾春地，邹良强，张 曼

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1562-1567. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.031

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  目的 通过对我院医学检验科生化专业组2012～2017年连续6年参加美国病理家协会（College of American Pathologists, CAP）组织的常规化学能力验证计划的成绩进行统计分析，全面评价检测性能，发现存在的问题并对其进行改进，为质量控制提供依据，提高检测结果的准确性。方法 评估首都医科大学附属北京世纪坛医院医学检验科生化专业组2012～2017年参加CAP常规化学的PT结果，对失控项目的原因进行统计分析。结果 2013年项次合格率最高，为100%；2014年项次合格率最低，为87.5%；共有19个检测项目在2012 年至2017年成绩全部为100分，13个项目出现过成绩不合格；导致项目不合格的所有原因中，PT样本问题最突出，占68.75%；其次是检测系统问题和分组不恰当，均为9.38%，随机误差占比6.25%；技术问题和书写错误占3.13%。结论 CAP的能力验证活动可以用于对实验室的检测能力进行评估，对2012年-2017年参加CAP的常规化学能力验证成绩进行总结，分析探讨不合格原因并采取相应纠正措施，可以进一步提高实验室结果的可靠性、准确性及可比性，以保证实验室对患者的服务质量。
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  均相酶免疫法测定尿激素类项目的性能验证

  张晓红，郭拥军，刘向祎

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1568-1573. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.032

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  目的 验证均相酶免疫法尿游离皮质醇（COR）、17-羟类固醇（17-OHCS）、17-酮类固醇（17-KS）和香草扁桃酸（VMA）试剂盒在全自动生化分析仪Beckman DXC800上的性能，并初步评价其临床应用价值。方法 依据WS T420-2013文件(临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证)进行实验设计。精密度验证：采用各项目试剂盒配套的2水平质控品重复测定3次，连测5天，计算尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA的重复精密度、期间精密度和实验室内变异系数（coefficient of variation, CV），并与厂家提供的数值进行比较，如果实验数值小于厂家数值，则验证通过。正确度验证：采用各项目试剂盒配套的定值校准品进行批内重复测定2次，验证4个项目各个水平定值校准品的均值与厂家提供的定值是否一致（相对偏移<1/2允许总误差），如果一致则表示正确度验证通过。同时，尿游离COR还采用20例随机住院患者的新鲜尿液标本，通过本试剂盒与Beckman化学发光法试剂盒检测进行比对。另外，尿游离COR和VMA还采用回收试验进行正确度验证。线性范围验证：选择配套定值校准品中的最高值，与最低值按比例进行混合稀释后，每个水平测2次，计算均值和偏移，并计算相关系数平方r2。生物参考区间验证：选取20例表观健康体检人员的新鲜尿液标本，验证尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA的参考区间。结果 测定各项目试剂盒配套的2水平质控品，尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA低值质控品实验室内CV分别为：5.01%、3.75%、7.52%和6.11%，高值质控品实验室内CV分别为：5.24%、6.32%、6.26%和4.38%，4个项目实验室内CV均小于厂家提供的数值（均为10%），精密度验证通过。正确度验证时，4个项目各水平定值校准品均值的相对偏移均小于1/2允许总误差（25%）。尿游离COR本试剂盒与Beckman化学发光法试剂盒检测结果一致。尿游离COR回收率为109.75%，尿VMA回收率为93.67%。线性范围验证时，尿游离COR的线性范围为20.0～1600.0 ng/ml，尿17-OHCS的线性范围为0.0～60.0 mg/L，尿17-KS的线性范围为2.0～130.0 mg/L，尿VMA的线性范围为2.0～100.0 mg/L，各项目相关系数平方r2均大于0.995。生物参考区间验证，20例表观健康体检人员的新鲜尿液标本，4个项目检测结果均在厂家提供的参考区间范围之内。结论 此均相酶免疫法尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA试剂盒在全自动生化分析仪Beckman DXC800上具有良好的精密度、正确度和线性范围，性能指标符合质量标准，可满足临床测试要求。
病例报告
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  99Tcm-MDP全身骨显像发现肿瘤样钙质沉着症1例

  石 磊,田 蓉

  标记免疫分析与临床. 2018, 25(10): 1574-1576. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2018.10.033

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