标记免疫分析与临床

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2008～2010年我院下呼吸道感染革兰氏阴性杆菌的耐药分析

孟祥红，孙红宁，孙敏霞，朱蕾，蒋滢，王迪，董跃明

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 353-355.

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了解我院2008～2010年医院下呼吸道感染主要病原菌的分布及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。回顾性调查下呼吸道感染者中的2555株革兰阴性杆菌的菌种分布及耐药性。分离菌株用全自动微生物鉴定仪进行菌株鉴定和药敏试验。结果表明: 连续三年分离率居前五位的革兰氏阴性杆菌为:铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希氏菌和嗜麦芽窄食单胞菌。大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南100.0%敏感,对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星较敏感,但对两药的耐药率呈逐年上升趋势;铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各类抗菌药耐药率较高,在这三年中耐药率呈逐年上升趋势,且出现泛耐药菌株。应定期监测下呼吸道感染病原菌分布和耐药情况,为临床合理使用抗菌药提供依据。

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肺炎支原体感染患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 356-358.

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胸腔积液CYFRA21-1、NSE和CEA联合检测在肺癌分型及临床分期中的临床意义

胡河，李燕华，梁伟达，张秦

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 359-361.

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探讨胸腔积液中CYFRA21-1(细胞角蛋白19片段)、NSE和CEA的检测在肺癌分型及临床分期中的意义。采用电化学发光法检测330 例肺癌患者胸腔积液和43 例良性胸积液中的CYFRA21-1、NSE和CEA水平。结果显示,肺癌组胸腔积液的CYFRA21-1、NSE和CEA水平明显高于良性胸积液组(P＜0.01 )。不同病理类型肺癌的标志物阳性率各不相同,鳞癌组CYFRA21-1阳性率最高,为65.5%;腺癌组CEA 阳性率最高,为65.0%;小细胞未分化癌组NSE 阳性率最高,为79.5%,三项联合检测阳性率高于单项检测;标志物水平与临床分期呈正相关,临床分期越晚,标志物水平越高,Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期( P＜0.05)。结论:CYFRA21-1、NSE和CEA 联合检测能提高肺癌检测阳性率,并对肺癌的分型及临床分期有临床意义。

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噬菌体法检测结核分枝杆菌的临床应用

董亚俊，郑秀云

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 362-364.

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研究噬菌体扩增试验对结核分枝杆菌快速鉴定的意义。应用结核分枝杆菌噬菌斑技术快速检测结核分枝杆菌及肺结核患者痰标本。结果显示:结核分枝杆菌H₃₇Rv、噬菌体扩增试验均为阳性;20株结核分枝杆菌临床分离株本法检测结果全部阳性;20份涂阳肺结核患者(用药时间在一周之内的)痰标本,本法阳性19份(95％);20份涂阴(应用抗结核药时间在10天之内的)肺结核患者痰标本,本法阳性11份(55％);10份涂阴结核性胸膜炎患者的胸水标本(应用抗结核药时间在10天之内的),本法阳性3份(30%)。结论:噬菌体扩增试验可以快速鉴定结核分枝杆菌,用其检测痰标本中的结核分枝杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性。

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螺旋CT联合C-反应蛋白、尿胰蛋白酶原-2检测对急性胰腺炎病情及预后的评估

朱月香，刘克芹，朱月明，崔书君，杨飞，尹卫东

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 365-368.

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探讨螺旋CT联合血清C-反应蛋白(CRP)、尿胰蛋白酶原-2(TPS-2)检测评估急性胰腺炎病情发展及预后的临床意义。回顾性分析急性胰腺炎(AP)患者79例、非胰腺炎(NAP)急腹症患者50例和健康体检者50例,分别检测血清CRP、尿TPS-2, 并对19例AP组的患者血清CRP、尿TPS-2进行动态监测, 同时对AP全部患者行螺旋CT扫描,将检测数据及CT表现进行综合分析。参照Balthazar CT分级:A级16例,B级19例,C级23例,D级15例,E级6例。A～C级为轻度胰腺炎(MAP),D～E级为重度胰腺炎(SAP)。SAP组血清CRP水平明显高于MAP组,经比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。AP组尿TPS-2阳性率明显高于NAP组,差异有统计学意义;SAP组阳性率高于MAP组,但差异无统计学意义。C～E级时血清CPR浓度明显高于A～B级时的浓度,具有显著性差异;B～E级时尿TPS-2阳性率高于A级时的阳率,但无显著性差异,且B～E级各级之间尿TPS-2阳性率检测无显著差异。结论:螺旋CT联合CRP、尿TPS-2检测对评估与监测急性胰腺炎的病情发展及预后有重要临床义。

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BNP、MYO、cTnI三项联合测定对AMI早期诊断的临床意义

沈振芳，朱同华，徐向东

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 369-371.

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通过采用化学免疫发光法定量检测47例急性心肌梗死(AMI)患者的BNP、MYO 、cTnI并进行对照分析,探讨AMI患者的血浆脑钠肽(BNP)、肌红蛋白(MYO)、肌钙蛋白cTnI的浓度变化和三者间的相关性,进一步揭示三者联合检测对AMI诊断的临床意义。结果表明,AMI组血浆BNP、MYO、cTnI的检测结果与健康对照组相比较均有明显差异(P＜0.05),AMI两组中KI组与KⅡ-Ⅳ组比较均有明显差异(P＜0.05);AMI患者的血浆BNP与MYO及cTnI之间具有较好的正相关;AMI组BNP、 MYO 、cTnI单项及三项联合测定的敏感性分别为93.6%、80.8%、91.5%、97.8%;特异性分别为95.2%、64.3%、95.2%、71.4%。因此,血浆BNP可作为临床预测冠心病患者发生AMI危险性的指标;BNP、MYO及cTnI联合检测可提高AMI早期诊断的敏感性。

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RPR、TP-ELISA和TPPA在无偿献血者梅毒筛查中的应用评价

张林伟，张娜，高素萍

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 372-373.

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评价快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)在无偿献血者梅毒筛查中的应用价值,选择适用于血站血液筛查梅毒的检测方法。选择无偿献血者20200份血液,采用RPR和TP-ELISA方法检测梅毒抗体,经初筛、复检阳性标本再以TPPA法确认。结果表明:RPR法阳性率为0.45%(91/20200),TP-ELISA法阳性率为0.767%(155/20200),阳性检出率差异有统计学意义(χ²=16.55, P＜0.01)。经TPPA法复检,阳性标本分别为61例和137例,与RPR符合率为67.0%(61/91, P＜0.01);与TP-ELISA符合率为88.4%(137/155,P＞0.05)。综合考虑方法学和实际操作的可行性,TP-ELISA阳性者需经TPPA法确认。TP-ELISA法是目前最适合血站无偿献血者梅毒筛查首选方法。

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HE4和CA125监测老年卵巢癌转归的价值

刘倩，郭健

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 374-379.

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探讨血清人附睾分泌蛋白4(HE4)和CA125在监测老年卵巢癌转归中的价值。选取年龄大于60岁、经手术和病理证实的卵巢癌患者75例、盆腔良性疾病患者73例、其它恶性肿瘤患者53例和健康人103名,采集血清进行HE4和CA125测定,并对其中12例老年卵巢癌患者的血清HE4和CA125水平进行17～32个月的随访研究,研究HE4和CA125与病情发展的关系。结果显示: HE4检测老年性卵巢癌的特异性优于CA125;随着治疗进行,HE4水平随病情缓解而降低,术后HE4水平下降比CA125快;病情复发时CA125升高时间比HE4平均滞后3～6个月。HE4始终处于高水平的患者病情预后差。结论: HE4对老年卵巢癌检测特异性高,可用于监测治疗效果、预测病情复发和预后。

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绝经后骨质疏松症患者血清NO-iNOS系统及相关激素水平变化的探讨

郑青，陈寒超

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 380-381.

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观察绝经后骨质疏松症(PMO)患者NO、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及E₂、GH、PTH、25(OH)D₃等相关激素,探讨NO-iNOS系统及相关激素在骨质疏松发病机制中的作用和意义。80例绝经1年以上女性,根据扫描骨密度(BMD), Tscore值,分为骨质疏松组(OP组)34例,非骨质疏松组(NOP组)46例,及绝经前女性为对照组38例。用硝酸还原酶法测NO,分光光度法测iNOS, CLIA法测血清E₂、GH、PTH水平,ECLIA法测25(OH)D₃。结果显示,绝经后女性NO、iNOS、E₂、GH、25(OH)D₃水平显著降低,OP组又低于NOP组;PTH水平无明显改变。PMO患者骨丢失是骨转换加快和重建负平衡骨吸收超过骨形成所致, NO-iNOS系统与雌激素、GH参与PMO的病理生理过程。

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染色体核型异常所致反复流产的分析

兰旭青，张明，陈志英

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 382-383.

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为探讨染色体核型异常与反复流产的关系,对325例反复流产患者应用G、C显带技术进行了染色体核型分析。结果显示,325例反复流产患者中,染色体畸变14例,异常检出率为4.31%;其中数目异常7例(50%),结构异常6例(42.86%),复合异常1例(7.14%)。由此可见,染色体异常是导致妊娠妇女反复流产的重要因素。

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CXCL16与糖尿病肾病关系的研究

杨敏，李艳波，尹嘉晶，王红杰，王君，田慧

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 384-388.

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糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管并发症之一, CXC趋化因子配体16 (CXC chemokine ligand 16,CXCL16)是新近发现的一种细胞因子,具有清道夫受体作用和免疫炎症属性。本研究主要探讨CXCL16与2型糖尿病肾病之间的关系,进而为糖尿病肾病的诊断、治疗与预后提供新的思路。本实验研究对象选自哈尔滨医科大学附属第一医院内分泌科2010年8月至2011年1月的2型糖尿病住院患者共106例。根据病史、尿白蛋白排泄率(UAER)等资料将病人按有无糖尿病肾病病变及病变严重程度分为单纯2型糖尿病组(T2DM) 29例、早期糖尿病肾病组(早期DN) 35例、临床糖尿病肾病组(临床DN) 42例。采用酶联免疫法(ELISA)测定不同组别的糖尿病肾病患者和单纯2型糖尿病患者的血清CXCL16水平,并应用SPSS18.0统计软件分析不同组别CXCL16水平的差异及其与年龄、性别、病程、腰臀比、体重指数(BMI)、HbAlC、FPG、TG、TC、LDL-c、HDL-c、HOMA-IR等指标之间的关系。结果显示:①早期DN组、临床DN组的病程、HbA1C以及CXCL16含量均高于无肾病的T2DM组(P＜0.05),且临床DN组高于早期DN组(P＜0.05);② 相关性分析表明糖尿病肾病患者血清CXCL16与HDL-c呈负相(P=0.001),相关系数为-0.372;③ 经Logistic回归分析发现,病程和CXCL16的水平是糖尿病肾病病变的独立危险因素。结果说明,趋化因子CXCL16可能参与了糖尿病肾病的发生发展过程,在糖尿病肾病的发病机制中起重要作用,在临床上拟可作为诊断糖尿病肾病的参考指标。CXCL16与高密度脂蛋白呈负相关,其内在关系有待于我们进一步研究。

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类风湿关节炎四种自身抗体的检测及意义

王艾丽，严孝岭，刘国瑞，刘欢，齐名

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 389-391.

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为评估类风湿因子(rheumatoid factor, RF)、抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated pepdide, CCP)抗体、抗Sa抗体和抗角蛋白抗体(anti-keratin antibody, AKA) 自身抗体对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA) 诊断的意义,采用速率散射比浊法定量测定RF、ELISA法定量测定抗CCP抗体、免疫印迹法检测抗Sa抗体、间接免疫荧光法检测AKA,检测了123例诊断明确的类风湿关节炎患者、105例其他结缔组织病患者和78名键康人血清样本。结果显示:RF、抗CCP抗体、抗Sa抗体和AKA的诊断敏感性分别为62.6%、69.9%、35.8%和33.3%,RF的诊断特异性(79.8%)显著低于其它三种自身抗体(94.5%、95.6%和95.6%,P＜0.01);RF阴性患者的抗CCP抗体、抗Sa抗体和AKA阳性率分别为41.3%、15.2%和13.0%,RF与抗CCP抗体检测的阳性符合率为49.6%,具有较高的一致性(kappa值0.501)。因此,同时检测两种以上靶抗原不同的自身抗体可显著提高RA的诊断率,并可以发现不同个体RA病程中自身抗体表达的差异。

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牙周炎患者龈沟液中白细胞介素8水平的变化

郑健，李海如

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 392-394.

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研究牙周炎患者龈沟液(GCF)中白细胞介素8(IL8)的变化及其临床意义。采用RIA检测了成人牙周炎患者(AP组)52例67个牙,快速进展性牙周炎患者(RPP组)23例37个牙和牙周健康对照组(H组)31名49个牙的龈沟液(GCF)中的IL8水平的变化并记录受检牙的牙周破坏指数PD、AL。结果表明AP组、RPP组患者GCF中IL8水平明显高于对照组(P＜0.01)且与PD、AL呈显著正相关(P＜0.01)。提示IL8是参与牙周炎发生发展及其牙周破坏重要的细胞因子之一。

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2型糖尿病患者肝脂肪酶基因标签单核苷酸多态性与血脂水平分析

张阳东，冯鑫，穆飞航，楚瑞雪，时磊，陈珂

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 395-397.

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观察汉族人群肝脂肪酶(HL)基因2个标签单核苷酸多态性(SNP)与2型糖尿病(T2DM)及血脂代谢的相关性。应用荧光标记单碱基延伸分型技术及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测HL基因rs12462668和rs10426971多态性。用全自动生化分析仪检测CHO、TG、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白A1(ApoA1)及载脂蛋白B(ApoB)。结果表明:T2DM组rs12462668的AA、GG基因型频率、等位基因频率及由2个SNP构建的单倍型频率与对照组比较差异有统计学意义。T2DM组的TG和ApoB显著高于对照组,HDL-C和ApoA1显著低于对照组。组间各基因型血脂水平比较结果显示,2个SNP与TG、HDL-C和ApoA1代谢紊乱有关。组内各基因型间血脂水平比较结果显示,T2DM患者的HDL-C水平与rs12462668多态性有关,而TG水平与rs10426971多态性有关。这提示HL基因的2个标签SNP与T2DM的发生密切相关,并可影响血脂的代谢。

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罕见的IgA型M蛋白对临床化学检测的干扰及分析

李江，王立伟，赵兴波，陈露，湛玉良，鄢盛恺

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 398-401.

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通过典型病例探讨单克隆免疫球蛋白血症患者样本中M蛋白干扰临床化学分析的机制。选取典型的IgA型M蛋白干扰病例1例与既往不同类型M蛋白干扰病例1例比较分析,探讨干扰产生的原因。结果显示:不同类型M蛋白产生干扰的条件有所差异,临床实验室常规方法无法完全消除此干扰现象。结论:在临床化学实验室工作中,尤其是检测患有单克隆免疫球蛋白血症患者的血清时,M蛋白干扰现象较为普遍且无法完全避免,应该引起检验工作者的注意。

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细菌性阴道病患者阴道菌群特征的非培养分析

王克迪，吕治，苏建荣

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 402-406.

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细菌性阴道病(bacterial vaginosis, BV)是一种阴道菌群失调所致的常见病,许多阴道菌群为厌氧菌,培养条件要求苛刻,很难纯培养和分离鉴定。本研究旨在通过非培养方法,明确BV患者阴道菌群特征。根据Amsel标准和Nugent评分筛选BV患者和健康育龄期妇女各30例,提取细菌基因组DNA,构建细菌16SrRNA基因文库。同时,应用特异性PCR方法扩增标本中的阴道加德纳菌、阴道阿托波菌、乳酸杆菌等8种阴道常见细菌,比较两组间各菌种的检出率。结果显示:BV患者阴道分泌物涂片以革兰染色不定或阴性的小球杆菌为主,并形成特征性的线索细胞。特异性PCR显示,BV患者阴道加德纳菌、阴道阿托波菌、普雷沃氏菌属、纤毛菌属、巨球菌属和羞怯动弯杆菌的检出率显著高于健康人群,而卷曲乳酸杆菌检出率显著低于健康人群,差异有统计学意义。文库构建显示BV患者菌群构成呈多样化,个体差异明显,共检出34种细菌,克隆子百分比排列在前5位是:Gardnerella vaginalis(23.0%),Prevotella species(18.57%),Megasphaera species(14.3%),Leptotrichia species(10.57%),Atopobium vaginae(6.4%)。与之相比,健康人群阴道菌群构成单一,以卷曲乳酸杆菌和惰性乳酸杆菌为主。结论: BV患者阴道菌群表现为乳酸杆菌显著减少甚至缺失,而以阴道加德纳菌、阴道阿托波菌、普雷沃氏菌属、纤毛菌属和巨球菌属占优势,同时多种其他厌氧致病菌共存的病态表现。而健康育龄期妇女阴道分泌物菌群表现为以乳酸杆菌占绝对优势、尤以卷曲乳酸杆菌为主、同时多种细菌共同存在的一种稳态。

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景天三七对阿司匹林大鼠血小板及凝血功能影响的实验研究

刘克芹，尹卫东，郑文芝，石永威

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 407-410.

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探讨景天三七对阿司匹林大鼠血小板及凝血功能的调节作用。以阿司匹林按3mg/Kg给大鼠灌胃制备大鼠模型,景天三七生药2mg/Kg灌胃治疗14天。分别于7天、14天后,采大鼠静脉血,测血小板聚集率、PLT、PT、APTT、TT及Fg水平。结果表明:经阿司匹林处理后,大鼠血小板数量、聚集功能显著降低(P＜0.01)。而景天三七治疗后的治疗组,和模型对照组比较,血小板数量、聚集功能上升(P＜0.01), TT于治疗7天后明显缩短(P＜0.05);14天后,和模型对照组比较,血小板数量、聚集功能上升(P＜0.05),TT明显缩短(P＜0.05),而APTT于治疗7天、14天后明显比模型组缩短 (P＜0.05),FIB随着治疗时间延长,也明显增多(P＜0.05),血小板数量也明显回升(P＜0.01)。而血小板最大聚集率明显低于正常对照组(P＜0.01)。景天三七通过提高血小板数量和聚集能力,达到止血作用。

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人CPNE5多克隆抗体的制备

靳雁斌，丁学锋，司慧远，吴彦瑞，王晓文，范文红，范明

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 411-415.

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制备人CPNE5的多克隆抗体。将CPNE5基因中423bp(626-1048bp)的片段构建到原核表达载体pGEX-5X-1,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达蛋白,经SDS-PAGE分离纯化得到抗原肽段,质谱法鉴定后常规免疫家兔。用CL-4B柱纯化抗体。结果显示,成功表达并纯化了人CPNE5抗原肽段;ELISA显示抗血清具有高亲合性,Western blot检测表明抗体能特异性识别CPNE5。本文制备的抗体经检验证实为高亲合性和特异性的兔抗人CPNE5多克隆抗体。

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两种不同方法学检测PSA、CA125、CA15-3、CA19-9的比对研究

魏玉署，杜光艳，洪伟

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 416-418.

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为探讨不同检测方法测定PSA、CA125、CA15-3、CA19-9结果的可比性,参考EP9-A2文件的规定,使用RIA和微粒子酶免疫方法(MEIA)测定PSA、CA125、CA15-3及CA19-9并进行方法学比对试验,两种方法各项结果间均呈良好的线性关系,其相关系数R²均大于0.95;PSA和CA15-3系统误差均小于临床允许误差,CA125和CA19-9系统误差均高于临床允许误差。即4个项目中PSA和CA15-3比对结果可以被临床接受,CA125和CA19-9比对结果不能被临床接受。

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不稳定心绞痛患者血浆基质金属蛋白酶8水平探讨

石新路

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 419-420.

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异位妊娠患者血清β-HCG、孕酮及抑制素-A水平变化及其临床意义

陈芳芳，王国洪，张中书，李晓军

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 420-421.

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泌尿生殖道支原体培养及耐药分析

黄伟，石磊

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 422-423.

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AKA抗体、抗-CCP抗体和RF分型在类风湿性关节炎诊断的应用

隋振铁，郝铁，刘冰

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 423-424.

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免疫数值化法和免疫胶体金法粪便潜血试验临床应用比较

李军，徐朝，郭志强，李基克，蒋芬

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 425-426.

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血清糖类抗原CA125在良、恶性疾病诊断中的价值和分析

陆俊钢

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 427-428.

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ELISA方法在基础医学研究中的应用及注意事项

徐瑞霞，时那，宋莉，张燕婉，叶珏，孟宪敏

标记免疫分析与临床. 2011, 18(6): 429-433.

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1971年瑞典斯德哥尔摩大学的Engvall和Perlmann ^[1]首次建立了酶联免疫吸附测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)方法,用于定量检测家兔血液中的IgG。四十年来,随着单克隆技术的发展应用及免疫试剂盒的商品化,ELISA已广泛应用于临床医学、动物检疫、食品科学、植物病毒、药物残留等分析领域,这一技术的普遍应用归功于商品试剂盒和自动或半自动检测仪器的研发与问世^[2]。ELISA不仅在临床检验工作中占有举足轻重的地位,它在医学基础研究中的应用也越来越普遍并发挥着重要作用。目前关于ELISA原理及方法应用的文章已经很多,其中不乏内容完备者,但是,我们在承担心血管领域科研课题进行ELISA检测过程中又发现了很多的基本问题,例如:许多研究者因为对ELISA了解不够全面深入,在收集样本时处理不当、购买何种检测试剂盒、如何计算所需试剂盒的数量以及在ELISA检测过程中需要注意的各种问题,等等。上述问题看似琐屑,实际操作不当却会直接影响测定结果的准确性。本文旨在总结ELISA操作的实际经验,从基础研究的角度出发,简要介绍ELISA实验方法的基本原理、分类及应用,重点讲述在基础医学研究中应用ELISA方法时需要注意的一些事项,以便为研究者提供一定的参考和帮助。

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2011年, 第18卷, 第6期　刊出日期：2011-12-25

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