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2017年, 第24卷, 第3期 刊出日期:2017-03-25
  

  • 全选
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    临床研究
  • 周丽萍1,乔 羲1,刘毓刚1,吴丽娟2
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 241-246. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.001
    摘要 ( ) PDF全文 (10942KB) ( ) 可视化 收藏
    目的 分析血清同型半胱氨酸(HCY)水平及其代谢相关基因多态性与缺血性脑卒中发生关系,并初步评估影响缺血性脑卒中预后的危险因素,为临床的诊治及预后分析提供实验室依据,以便及时进行临床干预。方法 收集187例缺血性脑卒中患者的全血及血清样本,其中短暂性脑缺血发作(TIA)组82例、脑梗死组105例(包括可逆性神经功能障碍、进展性卒中和完全性卒中),以同期188例体检健康者作为健康对照组。全自动生化仪检测血清HCY、GLU、CHO、TG,DNA测序法检测MTHFR基因rs1801133及rs1801131位点基因型及等位基因分布频率。各组间HCY、GLU、CHO及TG比较采用单因素方差分析,MTHFR基因多态性比较使用卡方检验,采用二分类 Logistic 回归分析对缺血性脑卒中的预后因素进行评估。结果 脑梗死组血清HCY、GLU、CHO及TG水平均显著高于TIA组和健康对照组(P<0.001),且脑梗死组HCY显著高于TIA组(P<0.05);脑梗死组和TIA组 MTHFR基因rs1801133位点TT基因型及T等位基因频率,rs1801131位点CC基因型及C等位基因频率显著高于健康对照组(P<0.05),而前两组间差异无统计学意义(P>0.05),且TT和CC基因型能显著升高各组人群的血清HCY水平(P<0.05)。多因素 Logistic 回归分析显示血清 HCY、GLU、CHO、TG以及年龄是影响缺血性脑卒中90天预后的独立危险因素。结论 血清HCY水平与缺血性脑卒中的发生发展及预后密切相关,体内HCY代谢关键酶MTHFR基因rs1801133及rs1801133位点突变可能通过影响血清HCY水平来影响缺血性脑卒中的发生发展。
  • 论文
  • 王依屹,张 珏,鲁传翠,孟佳丽
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 247-249, 289. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.002
    摘要 ( ) PDF全文 (2828KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  探讨超氧化物歧化酶(SOD)及游离脂肪酸(FFA)联合检测在胰岛素抵抗疾病中的应用价值。方法  选择300例2型糖尿病(DM2)患者,其中150例合并非酒精性脂肪肝(NAFLD),空腹采血检测超氧化物歧化酶(SOD)、游离脂肪酸(FFA)、胰岛素(INS)、葡萄糖(FPG)、脂类等实验室指标,同时做肝脏瞬时弹性检查(FibroScan)和受控衰减参数(CAP);选择150例体检健康者为对照组,做相同检测。结果  糖尿病组和合并NAFLD组检测结果进行对比,各项指标的差异均具有统计学意义(P<0.05),糖尿病组、合并NAFLD组与对照组的检测结果进行对比,各项指标的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论  超氧化物歧化酶及游离脂肪酸联合检测在胰岛素抵抗疾病中有重要的应用价值。
  • 临床研究
  • 李雨佳,毕宏远,高 岩
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 250-256, 301. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.003
    摘要 ( ) PDF全文 (7379KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  观察血清降钙素原( PCT)、C反应蛋白( CRP) 及其动力学变化,评估其在严重脓毒症/感染性休克患者的诊断及预后价值。方法 本研究采用回顾性分析方法,2014年9月1日至2016年4月30日选择184例ICU中被诊断为严重脓毒症/感染性休克疾病患者,检测入院时血清PCT、CRP水平和治疗后第2,第3和第5天的PCT、CRP水平。结果 通过ΔPCT、ΔCRP评估PCT、CRP的动力学在存活者与死亡组中有显著性统计学意(ΔPCT2/0,P=0.0001;ΔPCT3/0,P=0.0001;ΔPCT5/0, P=0.0001;ΔCRP2/0,P=0.0069;ΔCRP3/0,P=0.0001;ΔCRP5/0,P=0.0001),在严重脓毒症和感染性休克组中也存在显著差异(PCT5,P=0.007;ΔPCT5/0,P=0.007)。受试者工作特征曲线(ROC)模型显示,ΔPCT3/0(AUC=0.721)、ΔPCT5/0(AUC=0.77)、ΔCRP5/0(AUC=0.766)水平判断严重脓毒症/感染性休克患者预后有较好的临床意义。ΔPCT5/0(0.619)对严重脓毒症或感染性休克有一定的辅助诊断效果,其在ROC曲线上灵敏度、特异性均较高的临界点为0.624,所以,以第5天的血清ΔPCT5/0水平>0.624可作为预测感染性休克的临界点。结论 血清中PCT、CRP对严重脓毒症/感染性休克早期有较好的临床诊断及预后价值,其动力学研究可以提高对严重脓毒症/感染性休克诊断及预后评估的敏感性及准确性。
  • 陈 彬1,王 雪1,焦秀敏1,周玉玲1,张星光1,葛 飞1,陈 曦1,程千鹏1,张 锟2
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 257-260, 292. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.004
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    目的  应用静息态脑功能技术观察2型糖尿病患者脑区活动性的异常改变。方法  选择24例符合2型糖尿病诊断标准的患者为糖尿病组,与之匹配的24例健康志愿者为对照组,均进行头颅MR扫描,将采集的临床资料及提取活动性异常脑区进行多元回归分析。结果  2型糖尿病患者组相对于对照组存在多个异常的脑区活动ALFF值降低的脑区在颞叶、左扣带回、左小脑,增强的脑区位于右额叶、左海马、双侧楔叶。楔叶及颞叶改变与糖化血红蛋白存在相关性,楔叶与餐后血糖存在正相关。结论  2型糖尿病患者在尚未出现并发症阶段即出现脑区异常的改变,及早发现脑部病变对于临床早期发现及诊治具有积极意义。
  • 胡瑞兰1,张冬凤2,任 俊1
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 261-262. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.005
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    目的  探讨白细胞介素-18(interleukin -18,IL-18)水平在慢性心力衰竭(CHF)诊断中的应用价值。方法  选取2014年1月至2015年6月就诊的97例CHF患者为研究对象,依据美国纽约心脏病学会(NYHA)心脏功能分级标准,分为Ⅱ级(31例)、Ⅲ级(30例)和Ⅳ级(36例),并选择35例同期体检的健康人群为对照组。空腹采集肘静脉血,应用酶联免疫法检测IL-18水平。结果  CHF各组患者血浆IL-18水平与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。随着病情的进展,血浆IL-18水平呈显著升高趋势(P <0.05)。结论  IL-18用于评价慢性心力衰竭有一定的临床价值。
  • 周凯苏,赵卫华,柯玮琳
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 263-265. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.006
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    目的  分析重度子痫前期患者肝功能损害与围产儿结局的相关性。方法  回顾性分析114例重度子痫前期合并肝功能损害患者(观察组)及同时期100例重度子痫前期未合并肝功能损害患者(对照组)、正常住院分娩的100例孕妇(正常组)的临床资料,比较观察组与正常组血清谷氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、r-谷氨酰转肽(glutamyl transferase, GGT)水平,并比较观察组与对照组的围产儿结局,采用线性回归分析,分析血清ALT、AST、GGT与围产儿结局的相关性。结果  观察组血清ALT、AST、GGT水平均显著高于正常组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组胎儿生长受限、早产、围产儿死亡、胎盘早剥、死胎的发生率均大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);血清ALT、AST、GGT水平与胎儿生长受限、早产和围产儿死亡发生率呈正相关(P<0.05)。结论  重度子痫前期患者肝功能损害与围产儿结局的发生、发展具有明显的相关性,随着肝功能损害程度增大,可能导致胎儿生长受限、早产、围产儿死亡等不良围产儿结局发生。
  • 周 琪,张玉敏,顾 全,李艳琴
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 267-270. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.007
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    目的  探讨脂蛋白a(Lpa)、N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、白细胞计数联合检测在脑卒中诊断中的应用价值。方法 选取本院2015年5月至2016年5月收治的312例脑卒中(脑出血148例,脑梗死164例)患者作为研究对象,对照组选取体检健康者143例,比较各组的Lpa、NT-proBNP和白细胞计数,并且对脑卒中的可能危险因素进行统计描述性研究,探讨联合检测方法诊断脑卒中。结果  脑卒中组的Lpa、NT-proBNP和白细胞计数显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组与脑出血组的Lpa、NT-proBNP和白细胞计数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。脑卒中组Lpa、NT-proBNP和白细胞计数检测的阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),脑卒中组的Lpa、NT-proBNP和白细胞计数并联检测与串联检测的阳性率分别为92.6%和81.4%,显著高于健康对照组的4.2%和2.1%,差异有统计学意义(P <0.05),三指标并联检测的灵敏度度高于串联检测,特异性差异无统计学意义。脑卒中组高血压、糖尿病、吸烟、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、Lpa、NT-proBNP和白细胞计数与对照组比较,均有统计学差异(P<0.05)。结论  Lpa、NT-proBNP和白细胞计数是脑卒中的重要预测因子,Lpa、NT-proBNP和白细胞计数联合检测在脑卒中的早期诊治中有重要的价值。
  • 卢玉龙,田儒进,杨 坚,徐志勇
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 271-274. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.008
    摘要 ( ) PDF全文 (3638KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  探讨血清胱抑素C(Cys-C),叶酸(FA)、维生素B12(Vit B12)在慢性肾脏病早期肾损伤中的应用价值。方法  选择2014年3月至2016年8月在我院就诊的慢性肾脏病患者167例作为研究对象,按照慢性肾脏病的分期分为五组:第1期组(A组,32例)、第2期组(B组,32例)、第3期组(C组,33例)、第4期组(D组,34例)、第5期组(E组,36例),选择同期体检健康志愿者30例作为健康对照组,采用胶乳免疫比浊法测定血清Cys-C,电化学发光法测定血清FA和Vit B12,尿素酶-谷氨脱氢酶法测定血清尿素(Urea),苦味酸法测定血清肌酐(Scr)含量水平。结果:A组各指标测定结果与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);B组Scr、Urea与对照组及A组比较差异也无统计学意义(P>0.05),而血清Cys-C高于对照组和A组(P<0.05);C组、D组和E组各指标测定结果与对照组及A组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,Cys-C 、Urea、FA、Vit B12、Scr的AUC 及95%CI 分别为:0.697 (0.668~0.887)、0.538(0.491~0.792)、0.502 (0.504~0.822)、0.481 (0.532~0.865)、0.457 (0.484~0.775)。结论:血清胱抑素C、叶酸和维生素B12检测有助于早期肾功能损伤的判断,对控制慢性肾脏病发展有重要的临床意义。
  • 陈明发,黄 佳
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 275-278, 337. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.009
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    目的 运用荧光定量PCR法快速检测B族链球菌(GBS)感染并探讨其对妊娠结局及新生儿的影响。方法 收集1235例妊娠晚期孕妇阴道拭子,采用细菌培养法和荧光定量PCR法检测是否感染GBS,并比较GBS阳性和阴性两组患者的妊娠结局。结果 荧光定量PCR检测法阳性率显著高于细菌培养法(19.51% vs. 9.72%),且差异有统计学意义。两组孕妇妊娠结局和两组新生儿出生后健康状况如宫内感染、新生儿感染等发生率比较差异有统计学意义。结论 荧光定量PCR法检测GBS可早期预防治疗,有效改善孕妇妊娠结局和新生儿出生后健康状况,对孕晚期孕妇进行GBS 感染的检测具有重要的临床意义。
  • 尤 玮1,王泽新2,李 佳3,何克菲4,雷 益5
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 279-281, 337. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.010
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    目的  对食管癌、癌前病变、正常人群进行分析,探讨TAP检测在食管癌诊断中的价值,为临床应用提供依据。方法  选取2013年1月至2016年1月自贡市第四人民医院肿瘤科收治的经病理学检查确诊的50例食管癌患者、50例Barret食管患者及50例健康者进行分析,使用TAP检测技术对所有受试者进行检查,以病理诊断结果作为金标准,计算TAP检测系统的特异性、灵敏度、约登指数,评价TAP检测系统评价食管腺癌及Barrett 食管的检测效力。结果  对50例食管癌患者进行筛选时,TAP的诊断灵敏度为88.00%,特异性为88.00%,约登指数为0.76;对50例Barrett食管患者进行筛选时,TAP的诊断灵敏度为80.00%,特异性为88.00%,约登指数为0.68。结论  检测TAP在食管癌的诊断中具有较高的临床应用价值,其在临床筛选具有很大的参考价值。
  • 周 焰
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 282-286. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.011
    摘要 ( ) PDF全文 (3717KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  观察并探讨小剂量白细胞介素17A对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法  雄性SD大鼠45只,随机分3组:正常对照组、DN组及IL-17A组。DN组及IL-17A组均以高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型。IL-17A组给予小剂量IL-17A重组蛋白,连续给药12周后,下腔静脉取血,检测糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮等;将大鼠放入水平代谢笼中收集各组大鼠24h尿液,测定大鼠24h尿蛋白;实时荧光定量PCR检测肾组织炎症因子表达;Western blot测定IL-17A蛋白表达情况。 结果  DN组及IL-17A组尿蛋白、HbA1c、肌酐、尿素氮均显著高于正常对照组(P < 0.05);IL-17A组尿蛋白、肌酐、尿素氮均显著低于DN组(P < 0.05)。DN组大鼠在注射IL-17A后促炎因子表达显著减少,抑制性炎症因子表达显著降低。糖尿病肾病模型大鼠IL-17A蛋白显著减少。结论  IL-17A具有改善糖尿病肾病大鼠肾功能作用,并有可能逆转糖尿病肾病,是治疗糖尿病肾病的有效靶点。
  • 刘 斌1,胡慧琼2
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 287-289. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.012
    摘要 ( ) PDF全文 (2145KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  探讨糖化血红蛋白(HbA1c)联合糖化清蛋白(GA)测定在妊娠期糖尿病筛查中的应用价值。方法 对2015年3月至2016年3月在荆州市中心医院产科做产前检查的GDM孕妇(GDM组)和健康妊娠孕妇(对照组),进行外周血HbA1c、GA检测并分析两组受试者上述指标的差异。 结果  GDM组HbA1c、GA阳性检出率均高于对照组,差异具有显著统计学意义(均P<0.01);且GDM组中HbA1c与GA呈显著性正相关(r=0.958,P<0.01)。结论   HbA1c联合GA检测有助于妊娠期糖尿病的临床诊断和治疗,具有较高的应用价值。
  • 王 乐,杨 月,韦 夙,李小芬,郑玉萍
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 290-292. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.013
    摘要 ( ) PDF全文 (2142KB) ( ) 可视化 收藏
    目的 研究生长激素(GH)和泌乳素(PRL)在SLE患者血清中的表达及其与SLE病情程度的相关性。方法 将105例SLE患者根据活动评分分为4个等级,分别为无活动患者,轻度活动患者,中度活动患者,重度活动患者。选取86例正常健康者作为对照组。每组抽取静脉血5mL,ELISA试剂盒检测血清中GH和PRL的水平 。结果 SLE患者血清中GH和PRL的水平较正常对照组显著升高(P<0.01),且不同病理分级中的水平也不同,其中重度组的水平最高,中度、轻度、无活动期患者血清中的水平依次降低,但均比正常对照组水平高(P<0.01)。结论 GH、PRL在SLE患者血清中的表达较正常对照组显著升高,且随着病情程度的加重,其水平逐渐增加,这为SLE患者的进一步研究提供了有力的理论依据。
  • 张 烨,张 莉
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 293-296, 321. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.014
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    目的 评估血浆凝溶胶蛋白(GSN)动态变化对重症多发性创伤患者预后结局判断的临床价值。方法 选择我院就诊的67例多发性创伤患者,按创伤严重程度评分(ISS)分为:重症组:31例,ISS评分大于25分;轻症组:36例,ISS评分不大于25分。于治疗的第1、3、7、14d分别检测并比较两组的血浆GSN、降钙素(PCT)、肿瘤坏死因子(TFN-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及白介素(IL)-1。随访6月,比较两组的APACHEII评分以及阳性症状量表II (SAPSII)分值差异。依据预后结局分为:死亡组和生存组,比较两组上述指标的差异。应用多元Logistic回归分析上述指标与生存率的相关性。结果 两组患者的TFN-α、hs-CRP及IL-1各时间点数值差异无统计学意义 (P>0.05),两组血浆GSN均随着治疗时间增加而增加(P<0.05),而血清PCT随着治疗时间增加而降低(P<0.05)。与轻症组相比,重症组PCT、TFN-α、hs-CRP及IL-1水平在各时间均较高,而GSN水平在各时间均较低(P<0.05)。随访6月后,重症组APACHEII及SAPSII分值显著高于轻症组(P<0.05)。与死亡组相比,存活组GSN显著较高,而PCT、TFN-α及IL-1水平显著较低(P<0.05)。血浆GSN是重症多发性创伤患者生存率的保护性因素,而PCT及APACHEII是重症多发性创伤患者生存率的危险因素(P<0.05)。结论 血浆GSN动态变化能有效评估重症多发性创伤患者预后结局。
  • 刘 晖, 刘 刚, 罗莉丽
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 297-301. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.015
    摘要 ( ) PDF全文 (3235KB) ( ) 可视化 收藏
    目的 分析胱抑素C及趋化素(Chemerin)在糖尿病视网膜病变患者血清中表达的临床意义。方法 选取80例临床确诊的糖尿病视网膜病变患者作为研究对象,其中39例增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabeticretinopathy, PDR),41例无增殖性糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy, NPDR),以及选取同期的45例单纯糖尿病作为对照组,40例健康体检者作为正常对照组;对比4组研究对象的一般资料、临床和生化指标,包括性别、年龄、体重指数(BMI)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HONA-IR)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超敏C 反应蛋白(hsCRP)等,以及血清胱抑素C及Chemerin水平,并进行Pearson相关性分析。结果 对照组血清胱抑素C及Chemerin水平均显著高于正常对照组,PDR组、NPDR组均显著高于对照组,PDR组均显著高于NPDR组,且血清胱抑素C及Chemerin水平均随着糖尿病视网膜病变程度加大而升高,4组间的血清胱抑素C及Chemerin水平差异均具有统计学意义(均P<0.05);Pearson相关性分析显示:血清胱抑素C水平与收缩压、HbA1c、HONA-IR、FPG、TG、TC、LDL-C呈正相关(均P<0.05),而血清Chemerin水平与糖尿病病程、BMI、HONA-IR、尿白蛋白量、hsCRP呈正相关(均P<0.05);血清胱抑素C与Chemerin水平也呈正相关(P<0.05)。结论 血清高水平的胱抑素C及Chemerin共同参与了糖尿病视网膜病变的发生、发展过程,可能与糖代谢障碍有关。
  • 基础研究
  • 张 丽1,张春丽2,马 欢2,童冠圣1,文 哲1,王 强1,李思源1
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 302-307. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.016
    摘要 ( ) PDF全文 (6301KB) ( ) 可视化 收藏
    目的 探讨cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞的体外抑制作用及其在荷B16黑色素瘤细胞小鼠动物模型体内的分布及显像研究。方法 用MTT法检测不同浓度及作用时间cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞体外增殖能力的影响。采用直接标记法标记99Tcm-c(RGD)2。建立荷B16黑色素瘤株动物模型,待肿瘤体积为1.0~1.5cm3左右时,分别于30min、1h、2h、3h、4h、5h及6h时,进行荷瘤鼠体内生物分布及动态显像研究。结果  cRGD肽二聚体浓度为500mg/L、作用48h时,对B16黑色素瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用。室温下、ρ(SnCl2·2H2O)=1 g/L、反应时间为30 min时,99Tcm-c(RGD)2的标记率可达(87.42±3.21)%,标记产物经Sephadex G10分离纯化后放射化学纯度大于95%;静脉注射后30min行小鼠全身SPECT显像,肿瘤部位可见明显显像剂聚集,但肿瘤与周围组织的对比度较低;延迟至6小时肿瘤仍清晰可见,且随时间延迟肿瘤与周围组织的对比度增高,此时肿瘤/血液为2.15±0.24,肿瘤/肌肉为5.07±0.03。结论  该结构cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞株具有一定的体外抑制作用,且动物体内肿瘤组织摄取率高,显像清晰,证明其可进一步应用于聚合物多肽靶向药物的研发。
  • 李雷雷,郭 彬,郭佳培,吴景华
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 308-313. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.017
    摘要 ( ) PDF全文 (4657KB) ( ) 可视化 收藏
    目的 通过研究M2肿瘤相关巨噬细胞调控p53表达来下调肝癌化疗敏感性的机制,以此拓宽建立抗肿瘤耐药的措施。方法  构建小鼠肝癌模型及分离肝癌组织,研磨组织提取巨噬细胞,通过RT-PCR方法检测巨噬细胞表面CD206及CD163分子表达情况。培养人单核巨噬细胞(THP-1),PMA(100ng/mL)和IL-4(100ng/mL)作用诱导分化成肿瘤相关巨噬细胞后,与肝癌细胞(HepG2、SMMC7721,Hep 3B)共培养,加入奥沙利铂(20μg/mL)作用24小时,通过Western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2及p53的表达,通过MTT方法检测化疗对肝癌细胞增殖情况。结果  成功构建了肝癌模型,分离出了肝癌组织巨噬细胞,RT-PCR检测CD206和CD163的表达显著升高;人单核细胞(THP-1)经加入PMA(100ng/mL)和IL-4(100ng/mL)分化诱导48h后其细胞的表面CD206和CD163的表达明显高于THP1分化诱导的细胞表面表达量;肝癌细胞SMMC7721和HepG2与M2型肿瘤相关巨噬细胞共培养24h,经奥沙利铂作用后,肿瘤细胞Bcl-2表达明显升高,Caspase 3和p53的表达显著降低;肿瘤细胞的增殖抑制率明显降低,而Hep 3B细胞的凋亡则明显降低。结论  M2型肿瘤相关巨噬细胞调控肝癌细胞中p53的表达,进而抑制了肝癌化疗的敏感性。
  • 郭 彬,刘殿星,李雷雷,吴景华
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 314-316, 325. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.018
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    目的 通过探讨青蒿素调控p53表达进而诱导肝癌细胞凋亡的情况研究青蒿素抗肿瘤的机理。方法 20只C57小鼠随机分为空白组、PBS组、青蒿素组及青蒿素+Pifithrin-α组,每组5只。以PBS组、青蒿素组及青蒿素+Pifithrin-α组小鼠联合应用DEN/CCl4/乙醇构建肝癌模型。 空白组小鼠正常饲养3周,PBS组腹腔注射PBS 3周,青蒿素组腹腔注射青蒿素(100mg/kg)3周,青蒿素+Pifithrin-α组应用Pifithrin-α (50 mg/kg)隔日作用1周后,再与青蒿素作用3周。处死各组小鼠,分离小鼠肿瘤组织,Western blot检测肿瘤组织中Caspase3及p53的表达。结果 成功构建小鼠肝癌模型,青蒿素组荷瘤小鼠经作用后肿瘤组织Caspase3及p53蛋白表达显著增加,青蒿素+Pifithrin-α组荷瘤小鼠经Pifithrin-α预处理后,青蒿素诱导的细胞凋亡蛋白Caspase3显著降低。结论 青蒿素通过调控p53的表达诱导肝癌细胞凋亡,进而发挥抗肿瘤作用。
  • 谢斌华1,王 栋1,李 青2
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 317-321. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.019
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    目的 以大鼠为模型观察脊髓损伤修复过程中MEK5/ERK5(mitogen extracellular signal-regulated kinase 5/extracellular signal kinase 5)表达水平变化及临床指导意义。方法 将成年健康雄性大鼠随机分为实验组和假手术组,应用western-blotting蛋白质印迹技术和Real-Time PCR实时荧光定量检测技术分别检测脊髓损伤后1天,3天,7天,14天后MEK5、ERK5两种蛋白及其mRNA表达水平动态变化情况,通过考察P-ERK(phosphorylated extracellular signal kinase 5)表达水平考察ERK5激活情况。 结果 RT-PCR显示实验组组MEK5 mRNA和ERK5 mRNA表达水平均随时间呈逐渐增加的动态变化规律,且与假手术组相比表达水平明显增加;Western blotting显示实验组MEK5表达水平随时间先增加后回落,ERK5表达水平随时间逐渐增加,P-ERK表达水平随时间增加。结论 ERK5表达水平与脊髓损伤修复过程呈正相关,ERK5的促组织细胞分裂增殖的功能可能有助于脊髓损伤加速修复。
  • 李 婷
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 322-325. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.020
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    目的  探讨微小RNA( microRNA,miR)-646对EGFR/Akt通路的作用及对肺癌A549 细胞增殖扩散的影响及相关的作用机制。 方法  利用Lipo2000将miR-646 转染到肺癌A549 细胞中,采用实时荧光定量PCR(real time PCR,RT-PCR)法检测转染后各组细胞中miR-646 的表达;CCK-8 法检测细胞增殖;划痕和Transwell小室分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting法检测EGFR/Akt通路中各蛋白的变化水平。结果 RT-PCR 结果显示,转染miR-646组其miR-646表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组( P<0.05), A549细胞转染miR-646后,细胞增殖和扩散能力均显著降低( P<0.05);Western blotting 结果显示,转染miR-646 组中p-EGFR和p-Akt的蛋白表达水平均明显降低( P< 0.05)。结论  miR-646可显著降低肺癌A549细胞中p-EGFR、p-Akt的蛋白水平,进而抑制细胞的增殖和扩散能力。
  • 方法研究
  • 刘 婷,刘师卜,单 纯,张露勇
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 326-330, 313. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.021
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    目的  研究大鼠不同性别、血清样本放置条件及时间对生化检验结果的影响。方法  80只大鼠编号后一次性取静脉血,放置30min后离心,每只鼠血清分成8份。首次(1h)检测后,所有血清至于–80℃冰箱保存,一份于1、2、4、7、11、23、40d时间点重复解冻、检测后复存于–80℃冰箱;其余七份分别于以上时间点单次解冻、检测后丢弃;检测项目均为谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)。结果  雄性、雌性大鼠血清样本–80℃冰箱保存至40d 9个生化指标均与1h差异无统计学意义;雌性大鼠血清样本保存–80℃在1d、2d、4d、7d 4个时间点重复解冻,部分生化指标逐步显示差异有统计学意义,且随解冻次数及保存时间的增加,差异具有统计学意义的生化指标项数增加,第4次(7d)解冻后ALT、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第5次(11d)解冻ALT、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第6次(23d)解冻ALT、CREA、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第7次(40d)解冻ALT、AST、UREA、CREA、TG、GLU、TP、ALB指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。其余指标与1h测定结果比较无显著差异(P>0.05)。雄性大鼠血清样本保存–80℃重复解冻1~5次9个生化指标均与1h测定结果比较差异无统计学意义,第6次(23d)解冻TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(P<0.05);第7次(40d)解冻TG、TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05),其余指标与1h测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 不同性别大鼠血清–80℃条件下保存40d以内单次解冻后测定以及在大鼠血清解冻3次以内对生化指标测定值无影响;但重复解冻4次以上部分生化指标有显著差异,且不同性别大鼠血清指标差异情况不同,血清样本放置条件及时间及解冻次数会对大鼠生化检测指标造成影响。
  • 姜 欣1,2,康熙雄1,吕传臣2,王文艳3
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 331-337. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.022
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    目的 建立一种一次操作即可同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ荧光免疫层析的方法,检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的含量,用于辅助诊断慢性萎缩性胃炎和早期胃癌。方法 将鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线1(T1),将鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线2(T2),将羊抗兔IgG多克隆抗体喷到硝酸纤维素膜表面作为质控线(C);用荧光素分别标记鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)抗体、鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体和兔IgG抗体,将所制得的以上三种抗体荧光素标记物按一定比例混合,均匀喷到玻璃纤维素膜上制得荧光标记物垫;以双抗体夹心法反应模式制备同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ的荧光免疫层析法试纸条,并使用酶联免疫法试剂进行比对,对方法的线性、精密度、最低检出限、回收率、相关性等方面进行分析。结果 荧光免疫层析法检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ,进行Logistic曲线四参数拟合,R2均为0.99,拟合度较高;精密性CV分别为3.59%、3.40%;荧光免疫层析法与酶联免疫法的相关性较好(PGⅠ和PGⅡ分别为 r=0.99,r=0.99);最低检出限分别为0.81ng/mL和0.72ng/mL。结论 所建立的在一个检测条上同时测定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)含量的荧光免疫层析法方法,具有较好的特异性和较高的灵敏度,PGⅠ和PGⅡ无相互干扰,结果准确、操作便捷,便于我国基层疾控中心及医疗结构对胃蛋白酶原的检测。
  • 贾忠兰,卢 新,许丽风
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 338-340. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.023
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    目的 比较三种不同的方法检测B群链球菌的结果,对三种B群链球菌筛查方法进行效果评价。方法 收集我院2014年1月至2015年12月产科门诊孕35~37周孕妇1374例,采集孕妇的阴道拭子和肛周拭子标本,分别用血琼脂培养法,LIM肉汤增菌培养法和PCR方法检测B群链球菌。结果 1374例孕妇标本中,血琼脂培养法阳性60例,阳性检出率为4.4%,PCR方法检测阳性66例,阳性检出率为4.8%,LIM肉汤增菌培养法阳性128例,阳性检出率9.3%。三种筛查方法比较,LIM肉汤增菌培养法阳性率与PCR法,血琼脂培养法比较有统计学差异。血琼脂培养法和PCR法筛查阳性率没有显著性差异。以LIM肉汤增菌法为金标准,血琼脂培养法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为46.9%,100%,100%,94.8%,PCR法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为50%,99.6%,96.9%,95.1%。结论 LIM肉汤增菌培养法筛查B群链球菌的阳性率最高,血琼脂培养法和PCR法检测敏感率较低,只能筛查出50%左右的GBS定植孕妇。建议临床筛查B群链球菌使用LIM肉汤增菌培养法筛查GBS,敏感性高,特异性好。
  • 李云霞1,邬 兰2,邱 樊2
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 341-344,360. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.024
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    目的  将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价。 方法  依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件,应用Roche LightCycler? 480 II 实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500 型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行临床样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验。结果  LightCycler? 480 II 实时荧光定量PCR系统:2×106 IU/mL 浓度水平批内精密度为1.38%,批间精密度为0.25%;2×104  IU/mL 浓度水平批内精密度为0.35%,批间精密度为0.79%。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2.1×102 IU/mL至2.1×107  IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2=0.9994),临床可报告范围为2.1×102 IU/mL~2.1×108  IU/mL。该系统检测下限为148 IU/mL。ABI 7500 型实时荧光定量PCR系统: 2×106 IU/mL 浓度水平批内精密度为0.70%,批间精密度为1.34%。2.5×104 IU/mL 浓度水平批内精密度为1.18%,批间精密度为3.01% 。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2×102 IU/mL至2×108 IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2=0.9991),临床可报告范围为2×102 IU/mL~2×109 IU/mL。该系统检测下限为203 IU/mL。 结论  圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在Roche LightCycler 480 II 实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500 型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围,检测结果无明显差异,均可准确快捷的对HBV DNA定量检测,为后续超敏定量工作奠定基础。
  • 刘绍伟1,2,姜慧英2,田喜凤1
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 345-348, 355. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.025
    摘要 ( ) PDF全文 (3588KB) ( ) 可视化 收藏
    目的  建立一套简单实用的人工判读抗核抗体荧光滴度结果的参考标准。方法  选择卫生部室间质评质控品:均质型1:1000,颗粒型1:320。通过3.2倍稀释获得:均质型1:320、均质型1:100、颗粒型1:100样本。随机用四个批次的试剂分别对样本进行测定,运用EUROIMMUN全自动判读仪读取并记录每个样本滴度的灰度值和图像。按照实验室室内质控的建立方法,计算灰度值的均值,该灰度值对应图像作为参考标准图像,并对该图像进行临床验证。结果  计算所得各核型不同滴度的灰度值均值,得到相应图像作为参考标准图像。临床验证,参考标准图像前后人工判读的准确性有所提高(P<0.05),一致性有所提高(P<0.05)。结论  通过参考标准的建立能够提高人工判读结果的准确性和一致性,有利于标准化的建立。
  • 综述
  • 徐建民,陈水平,陈建魁
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 349-355. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.02.026
    摘要 ( ) PDF全文 (4611KB) ( ) 可视化 收藏
    耐碳青霉烯类抗生素细菌严重威胁着患者的身体健康和耐药菌感染的治疗和控制。为了有效地预防和治疗由产碳青霉烯酶菌株造成的感染,采取及时有效的检测方法显得尤为重要。国内外学者报道了多种试验方法用来检测产碳青霉烯酶菌株,主要包括表型检测方法和生物化学检测方法;近年来研制的MALDI-TOF MS技术应用于临床微生物鉴定逐渐显示出其优越性,用于产碳青霉烯酶菌株耐药的检测也有较好的临床应用前景。随着基因测序成本的不断下降,多重实时PCR、第二代测序等方法也逐渐应用于临床实验室。本文就碳青霉烯酶的检测方法研究进展加以综述,以期为医学微生物检验工作者选择检测方法提供参考。
  • 研究报告
  • 黄秀香,张 萍,叶迎宾
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 356-358. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.027
    摘要 ( ) PDF全文 (2038KB) ( ) 可视化 收藏
  • 张石喜,李艳琴,徐红妹,张玉春,余 静
    标记免疫分析与临床. 2017, 24(3): 359-360. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2017.03.028
    摘要 ( ) PDF全文 (1429KB) ( ) 可视化 收藏